SUMO 蛋白酶

描述：

SUMO 蛋白酶，也称为 UIP 蛋白酶（分子量 26kD），是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶。SUMO 蛋白酶以一种非常特异的方式切割蛋白，它特异性识别 UBL 蛋白的三级结构－SUMO，而不是氨基酸序列，故该蛋白酶可以切割重组融合蛋白的 SUMO。切割的 温度为 30°C，该酶作用温度和 PH 范围（pH7-9）都比较广泛。酶切后，可通过Ni-NTA Resin 亲和纯化很容易地将 SUMO 去除。SUMO 蛋白酶是自 E.coli 表达经亲和纯化的重组蛋白酶。

组分

活性定义：在 1×SUMO Protease Buffer-Salt (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% NP-40, 1 mM DTT)中，30°C 反应
1h，剪切>85％的 2 μg 对照底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
应用：融合蛋白标签剪切去除。
储存：SUMO 蛋白酶置于-70°C 可保存 2 年；-20°C 可保存6 个月，避免反复冻融；10×SUMO Buffer 置于-20°C 保存即可。
操作方法
若蛋白为热不稳定性，请在 4°C 孵育较长时间或增加酶的用量。
1. 在 EP 管中配制如下反应体系

2. 混匀上述体系后于 30°C 孵育，在 1、2、4、6 小时分别吸出 30 μl 上述反应液，置于单独的 EP 管中。
3. 向上述 EP 管中加入 20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20°C。
4. 取 30 μl 样品进行 SDA-PAGE 分析。
注意事项
为达到 的酶切效果，请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。对于大部分融合蛋白，SUMO 蛋白酶所需 NaCl 的浓度不同的蛋白情况会有所差别，可根据实际情况在0～300 mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到 的效果。

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