联系方式
地址:上海市松江区新车公路185号上海莘莘学子创业园
联系人:周经理
电话:021-67680335
手机:13052188602
邮箱:shlmai@163.com
网址:www.shlmai.com
PBCV DNA连接酶
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:1250U
  • 货号:LM83102D
  • 价格: ¥600/瓶
  • 发布日期: 2023-02-14
  • 更新日期: 2024-06-14
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83102D
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 %
规格 1250U
是否进口

PBCV DNA连接酶

描述:

PBCV DNA 连 接 酶 也称为 SplintR 连接酶 或Chorella 病毒 DNA 连接酶,它能够高效催化相邻的 DNA 核苷酸的连接,这个连接过程需要一条互补的 RNA 在两条DNA 单链间起“夹板”或“桥梁”的固定作用。PBCV DNA 连接酶的这种活性远远优于传统的 T4 DNA 连接酶,有助于miRNAs 和 mRNAs,包括 SNPs 在内的研究方法的创新。另外,在二代测序和分子诊断等众多领域中,PBCV DNA连接酶是富集目的基因的理想选择。它具有稳定的生物活性,对 RNA 介导固定的 DNA 底物亲和性强(米氏常数Km = 1 nM),能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特定 RNA。因此,在 RNA 检测技术中,PBCV DNA 连接酶不失为 选择用酶。

组分

2023021408531161190

储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:1 单位指 20 μl 反应体系中,1×PBCV 连接酶反应缓冲液,16℃ 条件下,15 分钟内能使 2 pmol 的
DNA:RNA 杂交底物连接反应完成 50%所需的酶量。
应用
单链 DNA 的连接
基于探针法的 miRNA 的检测
SNP 或剪接体的检测
RASL 分析
反应温度及失活
该酶的 反应温度为 25°C,可在 16-37°C 之间优化,37℃可明 显 提 高反应的特异性;该酶在 65°C 加热 20min 即可失活。

注意事项
1. 1×PBCV Ligation Buffer:50 mM Tris-HCl pH 7.5,5mM MgCl2,0.1mM ATP, 10 mM DTT。
2. 该酶对 ATP 的要求比较宽泛,10-100 μM ATP 范围内都可发挥活性,5 mM Mg2+可显著增加连接产物的量, pH为 7.5-8.0。
3. 该酶对一价阳离子非常敏感,如 NaCl 或 KCl 的浓度应低于 50 mM,100 mM 的 NaCl 会完全抑制连接反应。
4. 该酶的反应温度为16~37°C,随着温度的上升酶活性会提高,但此时腺苷化产物也随之增加, 温度为25℃。
5. 连接效率随着夹板 RNA 长度的减少而降低,当长度小于等于 10nt 时,连接效率为零。
6. 供体的 5’端 个碱基为“A/T”时连接效率 。
7. 受体的 3’端 个碱基为“T”时连接效率 ,3’端
个碱基为“G”时连接效率最差。

使用方法
1.底物和夹板退火
建议反应体系中底物浓度在 50 nM~2 μM 之间,体系中酶的浓度低于 1 μM(该 SplintR 酶为 10 μM)。在连接反应中,酶的浓度可设为底物浓度的 2~3 倍。将等摩尔浓度的底物混合均匀,75°C 2min 后缓慢降温至室温。
2.连接反应
2023021408544534598
25°C 反应 15-60min。
3. 65°C 加热 20min,使酶失活。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


联系方式
手机:13052188602
Q Q:
手机访问官网
Copyright © 2024 上海联迈生物工程有限公司 XML 技术支持: 盖德化工网   食品商务网