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ssDNA/RNA 环化连接酶
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:2000U
  • 货号:LM82602AD
  • 价格: ¥600/瓶
  • 发布日期: 2023-02-08
  • 更新日期: 2024-06-14
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM82602AD
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 %
规格 2000U
是否进口

ssDNA/RNA 环化连接酶

描述:

ssDNA/RNA CircLigase 为热稳定的 DNA/RNA 连接酶,不依赖于 ATP,可催化单链 DNA 或单链 RNA 的分子内环化。环化反应中,要求催化底物单链 DNA/RNA 具有 5’-磷酸基团和 3’-OH 基团。对于大于 15nt 的单链底物,该酶都能高效的连接。

组分

2023020804442349681
活性定义:65°C 1h 条件下,催化 1pmol 5’-磷酸化的 ssDNA底物环化,所需的酶量定义为 1Unit。
储存:-20℃可保存 3 年。
反应实例
1. 按以下组分配制反应液

2023020804445619881

2. 失活反应

反应结束后,可加入终浓度 10mM EDTA 终止反应。或采用加热方式 85℃ 10min 加热失活。
使用注意事项:
(1) 环化底物 ssDNA 或 RNA 必须带有 5’磷酸基团,3’端含有 OH。
(2) 环化体系中的 ATP 浓度高于 20μM 以上时会极大抑制环化效率,甚至导致环化失败。因此建议底物为纯化产物。
(3) 由于本酶提高了耐热性,在 65℃条件下进行连接反应,在 测试中 Betain 无益于连接效率提升。
(4) 本酶主要进行分子内环化连接,分子间的连接未检测到。
(5) 本酶对 ssDNA 和 RNA 的环化效率极高,多数情况下,90%以上的底物被环化。未被环化的 ssDNA 可通过加入 5U的 Exonuclease I,37°C 消化 15min 去除,以获得高纯度的环化 ssDNA。未环化的 ssRNA,将稍后给出去除方案。
(6) 本酶可以连接 15nt 以上的核苷酸,更长的产物连接参数,将稍后给出测试报告及 protocol。
(7) 对于连接底物量较少的实验来讲,推荐缩小体系,而不是减少酶的用量。在小体系实验时注意体系的蒸发,可加入矿物油以防止蒸发。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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