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一步法sgRNA 合成试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:25T
  • 货号:LM80601D
  • 价格: ¥1750/盒
  • 发布日期: 2023-02-08
  • 更新日期: 2024-03-04
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM80601D
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
规格 25T
是否进口

一步法sgRNA 合成试剂盒

描述:

CRISPR/Cas9 是一种由 RNA 指导 Cas 核酸酶对靶向基因进行特定 DNA 修饰的技术,也是细菌和古细菌为应
对噬菌体和外源质粒的攻击而演化来的一种获得性免疫防御机制。此系统的工作原理是通过人工优化的具有引导作用的 sgRNA(Single Guide RNA)引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 sgRNA 配对的靶位点处剪切双链 DNA,引起 DNA 断裂,进而利用生物体内非同源末端修复机制或同源重组机制修复 DNA,导致基因移码突变、替换或删除,致使基因功能丧失。

sgRNA 的体外合成通常有两种策略:一种为构建含特异性序列的转录质粒,另一种则使用合成的 oligo 退火延伸生成含 T7 转录启动子的双链 DNA 分子,进而再使用 T7 RNA 聚合酶进行体外转录,从而获得 sgRNA。利用合成的Oligo 直接制备 sgRNA,具有操作简单快速、可实现高通量等优势,已经成为体外合成 sgRNA 的 方案。Cas9 的切割是通过向导 RNA(gRNA)与靶 DNA 形成约 20bp 碱基的配对,且靶序列的 3’端需要有 PAM 结构(NGG),再引导Cas9作用实现的。本试剂盒可通过一步反应获得高纯度、高产量的sgRNA,仅需要合成一条含有特定靶标序列的Oligo,可 在 4h 内获得 50~80μg 的 sgRNA。

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注意:Positive Sense sgRNA Oligo 为阳性对照品,在实验时可用于质控反应体系。
保存:-20℃可保存 2 年,避免反复冻融。
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临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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