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5×HiFi One-Step RT-PCR Mix
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:250T
  • 货号:LM80405AD
  • 价格: ¥1000/盒
  • 发布日期: 2023-02-08
  • 更新日期: 2024-03-04
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM80405AD
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
规格 250T
是否进口

5×HiFi One-Step RT-PCR Mix

描述:

本试剂采用稳定高效的 RT-PCR 预混体系,是以 RNA为模板进行一步法 RT-PCR 的专用试剂。其原理为用基因特异性引物进行反转录反应,获得 链 cDNA(不可使用Oligo(dT)或 Random Rimer 合成 链 cDNA),再使用基因特异性正向引物和反向引物进行 PCR 扩增,在同一反应体系中一步完成从反转录到 PCR 的全部过程。反应体系中已含有电泳所需的指试剂(蓝色和黄色),反应后可以直接进行电泳。
在本试剂盒中,将耐热 M-MLV 反转录酶、Rnase Inhibitor、Hotstart 高 保 真 DNA 聚合酶以及稳定剂等配制成
50×One-Step Enzyme Mix 预混液;反应 Buffer、dNTP 以及电泳指示染料配制成 5×HiFi One-Step RT-PCR Buffer,因此使得操作更加简单便,扩增产物可用于平端克隆和 DNA 测序。

主要优势:
耐热M-MLV反转录酶可在55℃反应能更好的打开复杂二级结构,只需 10min 即可完成逆转录。
DNA 聚合酶为热启动型高保真酶,能够有效的抑制非特异性反应且具有较高的校正活性,酶激活仅需 2min。
具有宽泛的模板量兼容性,10 ng~1μg 都可有效扩增。

反应过程中无需开盖,避免了操作过程中的污染危害。

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储存:请置于-20°C,可保存 2 年;避免反复冻融。
注意:
1.50×One-Step Enzyme Mix 粘度高, 次使用之前要离心收集至反应管底部,吸取时应缓慢小心。
2.由于使用了 Hotstart 高保真 DNA 聚合酶,反应配制可在常温进行,但各组分应-20°C 保存。
实验操作和反应条件:
1. 按以下组分配制反应液
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注意:超过 1 μg 的 RNA 模板量会抑制 PCR 反应,建议 次可使用 200 ng 的 RNA 模板,然后根据结果进行优化。
2. 在 PCR 仪上按以下条件进行 RT-PCR 反应:
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3. PCR 反应结束后,可取 5 μl 产物直接进行电泳检测。预混液中已经包含绿色染料,无需再加入 DNA Loading Buffer。
1% Agarose 电泳时,蓝色指示剂指示 3~5 kb,黄色指示剂指示 <50 bp。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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