联系方式
地址:上海市松江区新车公路185号上海莘莘学子创业园
联系人:周经理
电话:021-67680335
手机:13052188602
邮箱:shlmai@163.com
网址:www.shlmai.com
Equi-phi29 DNA Polymerase
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:1000U
  • 货号:LM83703AA
  • 价格: ¥750/瓶
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-03-04
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83703AA
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 99%
规格 1000U
是否进口

Equi-phi29 DNA Polymerase

描述:

Equi-phi29 DNA Polymerase 是 phi29 的改造体,并经多次纯化分离而得。在保留了 phi29 DNA 聚合酶的链置
换、连续合成特性(>70kb)的基础上,提高了滚环扩增的反应温度,该酶酶可以在 42 度条件下持续的进行 DNA 合成(而 phi29 DNA 聚合酶在此温度下反应活性很低)。
这种高温的反应特性,在以下几个方面对实验有明显的提升:(1)在 NGS 测序中,其提升了高 GC 含量、回文结构等复杂模板的延伸能力,使得 NGS 的覆盖度更均一,降低测序所需深度;(2)高温的反应条件,提升了基因组 DNA的 WGA 产物的合成量,并可以进行变温扩增;(3)降低测序中 Gap 区域,提升单细胞测序的数据质量和完整度;(4)降低非特异性扩增产物;(5)提升 MDA/RCA 等实验的扩增性能和特异性。
除此外,该酶仍然具有很强的 3’→5’外切酶校读功能,合成的 DNA 片段保真性高。该酶的外切酶活性较强,因此合成过程中引物需要 3’端硫代修饰,以降低外切活性对引物的切割效应。

2023020704490421126

储存:-20℃可保存 3 年。

使用方法
1. 配制引物模板退火体系
2023020704492308460
注意:在不同的实验类型中,Oligo根据实验需要自行选择。
2. 引物和模板退火:体系配制完毕后,放置到 PCR 仪中,95℃ 3min,25℃ 3min。
3. 退火完毕后,向退火产物中加入 1μl Equi-phi29 DNA Polymerase,混合均匀。
4. 扩增反应
4.1 恒温扩增
对于环状DNA模板采用恒温反应作为推荐使用30℃恒温扩增,30℃孵育 6~16h.该酶在 30-42℃条件下均可工作,必要时根据实验类型进行调整。
4.2 变温扩增
对于基因组 DNA 或 cDNA 模板,推荐使用变温扩增反应,以在短时间内获得更高产量,并提高了低浓度模板的扩增产量。在 PCR 仪上做如下设置:
【30℃ 5min;42℃ 15s】循环 72 次(约 6h)或 120次(约 10h).
必要时,反应结束后,可于 65°C 10min 进行失活反应。
使用注意事项 
(1)必要时可单独额外添加终浓度 1 mM DTT 和 0.2mg/ml BSA,可提高反应效率。
(2)该酶的 反应温度为 42 ℃ (在 30~42℃之间均有活性)。
(3)65℃ 10min 即可使该酶失活。
(4)根据实验类型需要,调整dNTP的浓度100~500 μM。
(5)添加 Yeast Pyrophosphatase(货号:C5006)可提高 DNA 产量。
(6)反应引物 3’端的硫代修饰可避免引物降解。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。



联系方式
手机:13052188602
电话:021-67680335
Q Q:
手机访问官网
Copyright © 2024 上海联迈生物工程有限公司 XML 技术支持: 盖德化工网   食品商务网