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HotStart Bst 4.2 L-HNB Bead(紫绿变色冻干球)
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:100T
  • 货号:LM83831-06A
  • 价格: ¥1750/盒
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-05-27
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83831-06A
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 99%
规格 100T
是否进口

HotStart Bst 4.2 L-HNB Bead(紫绿变色冻干球)

描述:

该制品为全体系冻干微球制品,包含了 HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶、Helicaser、dNTP、Mg2+、反应缓冲、L-HNB 变色指示剂(Leuco-HNB, 隐色 HNB 染料),其它稳定剂。

Bst4.2 具有以下性能:(1)Bst 4.2 全系包含热启动Aptamer,该配体确保酶在<30℃时,酶活封闭效率>95%,
在>60℃时 1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大幅降低了低温条件下的非特异扩增;(2)反应温度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;(3)全系包含 Helicaser,因此,允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 LAMP 扩增(easy LAMP),并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。
制品中的 L-HNB 染料在反应起始前与 Mg2+结合产生深紫罗兰色,随着 LAMP 反应的进行,产生的 PPi(无
机焦磷酸盐)结合体系中的 Mg2+,使得 L-HNB 显示出淡绿色。

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储存:-20℃干燥密封保存 24 个月;室温(25℃)密封保存 12 个月。避免受潮。
特殊说明:
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 65-70℃, 反应温度为 70℃。因此其可完全替代 的 Bst4.0 系列,用于标准 LAMP的扩增。
(2) 由于 Helicaser 的反应温度为 70℃,因此在进行eLAMP 扩增时,反应温度为 70℃。
(3)制品中包含高浓度的盐组分,使用时做好个人防护,防止制品与皮肤、眼、鼻、呼 吸 道等接触和吸入,一旦接触或吸入,请用大量的清水冲洗。
(4)防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。

1. 标准 LAMP 和 eLAMP 扩增的区别
本试剂既可以用于标准 LAMP 扩增,也可以用于 eLAMP扩增。
1.1 10x 标准 LAMP Primer Mix
FIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer Mix
FIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意:eLAMP(easy LAMP)为去除 F3/B3 引物的方法,为 Bst4.2 系列专用的使用策略,对于大多数引物组,在Helicaser 的加持下,扩增速度几乎不受影响。如引物扩增效率低,可提高 FIP/BIP 浓度到 12~16 μM。
1.3 扩增温度不同
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2. 配制 LAMP 反应体系
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反应体系配好后,置于 65-70°C 反应 20~30min,反应完毕后观察颜色,紫色为阴性,绿色为阳性扩增。
注意事项:
(1)本制品在 1x 浓度情况下,对如下试剂的耐受度,Tris-HCl(pH8.0)≦10 mM; NaOH≦1 mM; Tween20%
≦1%; EDTA(pH8.0) ≦20 μM; 肝素≦0.5 IU/ml。
(2)L-HNB 是还原状态下的染料,任何强氧化剂(H2O2、次氯酸钠等)均会破坏 L-HNB 的结构,从而直接导致试剂变为深蓝绿色。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。



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