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HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可冻干)
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:200T
  • 货号:LM83831-02A
  • 价格: ¥2250/盒
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-11-05
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83831-02A
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
包装规格 200T
纯度 99%
CAS编号
是否进口

HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可冻干)

描述

本品为 LAMP 荧光检测专用的试剂,2.5xBst4.2 SYBR Green Mix 包含了 Helicaser、dNTP、Mg2+、SYBR
Green 染料、反应缓冲盐、冻干赋形剂和稳定剂。HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶为单独的组分。本品不仅可作为常规检测试剂,对于具有冻干经验的研究者,本品还直接进行后续冻干,无需再加入任何其它辅料。
Bst4.2 具有以下性能:(1)Bst 4.2 全系包含热启动Aptamer,该配体确保酶在<30℃时,酶活封闭效率>95%,在>60℃时 1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大幅降低了低温条件下的非特异扩增;(2)反应温度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;(3)全系包含 Helicaser,因此,允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 LAMP 扩增(easy LAMP),并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。

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储存:长期保存请置于-20℃以下(12 个月有效);制品反复冻融10 次不影响性能,但应避免反复冻融;制品由于含有高浓度的糖组分,-20℃保存的制品,在融化时可能会有结晶物。此时 2.5xBst4.2 Mix 可在 37℃进行 融化,而 Bst4.2 酶制品在 30℃的温度下融化,过高的温度可能会导致热启动性能下降。一经融化推荐置于2-8℃保存,在此条件下制品稳定储存 6 个月。
特殊说明: 
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 65-70℃, 反应温度为 70℃。因此其可完全替代的 Bst4.0 系列,用于标准 LAMP 的扩增。
(2) 由于 Helicaser 的反应温度为 70℃,因此在进行 eLAMP 扩增时,反应温度为 70℃。
(3) 制品中包含高浓度的盐组分,使用时做好个人防护,防止制品与皮肤、眼、鼻、呼 吸 道等接触和吸入,一旦接触或吸入,请用大量的清水冲洗。
(4)防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。

1. 标准 LAMP 和 eLAMP 扩增的区别
本试剂既可以用于标准 LAMP 扩增,也可以用于 eLAMP扩增。
1.1 10x 标准 LAMP Primer Mix
FIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer Mix
FIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意:eLAMP(easy LAMP)为去除 F3/B3 引物的方法,为 Bst4.2系列专用的使用策略,对于大多数引物组,在 Helicaser 的加持下,扩增速度几乎不受影响。如引物扩增效率低,可提高 FIP/BIP 浓度到 12~16uM。

1.3 扩增温度不同

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2. 配制 LAMP 反应体系 
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反应体系配好后,置于 65-70°C 反应 20~30min,1min 收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。
3. 试剂的冻干反应( 专业人员)
本试剂可供具有冻干经验的人员直接进行后续冻干,试剂的配方对冻干条件不苛刻。但对于不同的用户来讲,由于冻干形式、冻干体积、上机量、冻干容器、冻干磨具等因素存在差异,以下程序仅供参考。进一步的程序优化均需根据具体情况自行调整。对于非专业人员来讲,请直接采购 的冻干制品,或委托订制。
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制品成型后的冻干程序:
-50℃预冻 10min; -50℃ 4-8h(真空段);-50℃升温到 25℃(每小时升温 5℃);25℃ 2h; 25℃恒温。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。



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