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RCA滚环扩增试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50T
  • 货号:LM83702A
  • 价格: ¥1000/盒
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-03-04
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83702A
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
规格 50T
是否进口

RCA滚环扩增试剂盒

描述:

滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)是新近发展起来的一种恒温核酸扩增方法。以环状 DNA 为模板,通过一个短的 DNA 引物(与部分环状模板互补),在 phi29 DNA 聚合酶催化下将dNTPs转变成单链DNA,此单链DNA包含成百上千个重复的模板互补片段。这种方法不仅可以直接扩增 DNA 和 RNA,还可以实现对靶核酸的信号放大,灵敏度达到一个拷贝的核酸分子。
本试剂盒配备的 RCA Mix 预混合液,使用方便,简化了操作步骤,RCA Mix 为 4X 浓度,内含 Equi-phi29 DNAPolymerase、dNTP Mix、无机焦磷酸酶等。试剂盒配备的Random Hexamers 为 6 碱基随机引物可对目标分子进行指数放大(通常放大 10000 倍),特殊的实验可自行搭配相关引物。

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储存:-20℃可保存 3 年。
操作方法
1. 配制引物模板退火体系
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注意:在不同的实验类型中,Oligo根据实验需要自行选择。
2. 引物和模板退火:体系配制完毕后,放置到 PCR 仪中,95℃ 3min,25℃ 3min。
3. 退火完毕后,向退火产物中加入 5μl 的 4xRCA Mix,混合均匀。
4. 扩增反应
4.1 恒温扩增
对于环状DNA模板采用恒温反应作为推荐使用30℃恒温扩增,30℃孵育 6-16h.该酶在 30-42℃条件下均可工作,必要时根据实验类型进行调整。
4.2 变温扩增
对于基因组 DNA 或 cDNA 模板,推荐使用变温扩增反应,以在短时间内获得更高产量,并提高了低浓度模板的扩增产量。在 PCR 仪上做如下设置:
【30℃ 5min;42℃ 15s】循环 72 次(约 6h)或 120次(约 10h).
必要时,反应结束后,可于 65°C 10min 进行失活反应。
注意:
RCA 扩增还可应用于其它缺刻或诊断相应的实验,此时Random Hexamer 为非必须品。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。




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