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Bst 4.0 Basic Bead(冻干球)
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:100T
  • 货号:LM83828-02A
  • 价格: ¥2450/盒
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-04-30
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83828-02A
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
规格 100T
是否进口

Bst 4.0 Basic Bead(冻干球)

描述:

该制品为全体系冻干微球制品,内含恒温扩增所用的反应缓冲液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶
等,其不包含任何染料,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于DNA 的聚合酶活性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及RT-LAMP 扩增反应的 试剂。

本制品不包含任何显色染料,可自行搭配相关染料或检测手段进行 LAMP 反应,包括搭配 OG 染料管进行
橙绿变色、搭配标记 Oligo 进行试纸条检测、搭配荧光染料进行荧光检测、搭配 Molecular Beacon 探针进行荧光检测等方法。

使用方法:(进行 LAMP 橙绿变色扩增): 
1. 关于 OG 橙绿变色管(货号:A3828-21)说明:橙绿变色染料(OG Dye)以烘干的形式预加在8联管盖上。LAMP反应完毕后,将 0.2ml EP 管颠倒溶解 OG 染料后。LAMP 的反应产物将与 OG 染料形成绿色肉眼可见变色反应(阳性),而未扩增的 EP 管为深橙色(阴性)。本试剂管常温长期保存。
2. 配制变色 LAMP 反应体系
在 OG 染料管(0.2ml EP)反应管中加入下述试剂
2023020702153315189
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
注意:全部试剂加入完毕后,轻弹 EP 管底部后,再盖上 OG 橙绿变色管(盖上管盖后务必不能再剧烈混合与倒置,以防止将管盖上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入反应液中将会终止 LAMP反应)。
3. 反应体系配好后,置于 65°C 进行反应 15~30min。(扩增良好的引物组合,通常 20min 即可变色,一般不超过30min)。
4. 观察结果:反应结束后,从加热装置中将反应管取出,室温 2min,使整个反应管冷却下来。再次用力将反应管盖压紧,以防止液体泄露。将反应 EP 管倒置,并手腕轻甩,反应液浸泡 EP 管盖上的 OG 染料,静置 1min(中间可轻弹 1-2 次,以加速溶解 OG 染料)。再将 EP 反应管正置,并轻甩反应液到 EP 管底部,此时扩增样品将变为鲜艳肉眼可见绿色,而阴性未发生扩增的管将为深橙色。
注意:(1)观察结果时,尽可能不要与配制反应空间共用,以防止污染操作台。(2)尽管 选取的为高密封性的 EP 管,但也时有 EP 管发生液体泄露。在反应管倒置时,可用纸巾包裹 EP 管,一旦发生泄露,丢弃纸巾,防止台面污染。(3)整个操作过程,佩戴手套、口罩等个
人防护用品。
注意事项:
(1)关于矿物油的使用,在配制完 LAMP 反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,以减少气溶胶的污染。矿物油并不影响 OG 染料的溶解。
(2)在使用其它荧光染料时,使用浓度可自行优化,通常来讲,参考供应商提供浓度的 0.25~0.8x,过高浓度的染料可能导致扩增失败。
(3)本试剂不支持,浊度、pH 变色、HNB 变色反应,
请勿尝试。
(4)关于 LAMP 成品试剂的建议, Bst 4.0 Basic Bead冻干球和 OG 橙绿变色管均为室温稳定状态,可长期保存。将扩增引物加入到 OG 橙绿变色管底部,于 70°C 烘干,再加入一粒冻干球即可制备成全体系检测试剂。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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