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Bst 4.0 LowSalt Mix (液体预混,可冻干,无染料)
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:100T
  • 货号:LM83824-01A
  • 价格: ¥1650/盒
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-06-14
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM83824-01A
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
规格 100T
是否进口

Bst 4.0 LowSalt Mix (液体预混,可冻干,无染料)

描述:

该制品为单一组分的 Mix(2.5 倍浓度),包含了低浓度缓冲盐(Low Salt)、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶等,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于 DNA 的聚合酶活性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行恒温扩增。
由于 LAMP 在反应时会产生大量的 H+,导致反应体系 pH 下降(通常由 pH8.8,下降到 7.2 以下),因此,低缓冲盐体系条件下,可搭配 pH 敏感染料实现可视化检测LAMP 检测。该制品中包含低浓度 Tris(pH8.8)缓冲盐,在搭配 pH 敏感染料的情况下,可进行变色 LAMP 扩增。除此外,本试剂中不含有甘油,可用于建立冻干体系。

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储存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于2-8℃,保存 1 个月。反复冻融 10 次,不影响使用。如有白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影响使用。
使用实例(以 LAMP 红黄变色扩增为例):
1. 搭配使用红色 pH 指示染料,进行LAMP 变色反应。
2. 配制反应体系
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3. 盖上管盖,置于 65°C 进行反应 20~30min。 肉眼观察结果,黄色为阳性,红色为阴性。
4. 10xLAMP Primer Mix 的配制,FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。引物的稀释液均使用 ddH2O(pH8.0-9.0),不能使用含有 Tris 缓冲盐系统。由于该变色方法对 pH 敏感,多数情况下引物溶解后成酸性,因此在 10x 引物中加入终浓度 1 mM NaOH 使引物恢复到中性 pH(~8.5),注意 NaOH 需新鲜配制,可配制成 50-100 mM 浓度使用。
其它注意事项:
(1)该试剂对影响 pH 的缓冲盐敏感,因此模板中 Tris盐、NaOH 等成分对反应有至关重要的影响。在采用核酸纯化的样本检测时,推荐使用 ddH2O 进行洗脱。
(2)在使用粗制样本时建议使用 ddH2O 保存的样本进行检测。在对粗制样本进行检测时, 的粗制样本为拭孖样本,拭孖样本经 ddH2O 浸泡后,可以直接使用浸泡液作为模板进行扩增,无需核酸纯化步骤。
(3)关于 DEPC 水使用的特殊说明:由于 DEPC 处理过的 ddH2O 显示很强的酸性,会直接导致反应体系变为黄色。所以 DEPC 处理过的 H2O 必须经 NaOH 溶液调整pH 到 8.0-9.0 后方可使用。我们推荐直接使用,水机制备的 18.2ΩH2O,不影响 RNA 样本的扩增。
(4)该试剂中不含有甘油组分,因此具有冻干经验的人员可进行冻干试剂的开发。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。




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