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RAPA3G动物组织直扩PCR试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:80T
  • 货号:LM80609A
  • 价格: ¥80/盒
  • 发布日期: 2023-02-07
  • 更新日期: 2024-04-19
产品详请
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM80609A
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
规格 80T
是否进口

RAPA3G动物组织直扩PCR试剂盒

描述:

描述:RAPA3G DNA 聚合酶为经电子重构架的第三代 Taq DNA 聚合酶,第三代 DNA 聚合酶具有高度的杂质耐受性、长片段扩增能力、高扩增成功率、高产量,这些特点使得RAPA3G 系列产品可用于粗制样品的直接扩增,无需核酸纯化步骤。该 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切酶活性、3’-5’的外切酶活性,产物部分带有”A“尾巴,部分为平末端,因此产物可用于 TA 克隆或平端克隆。
特点和用途:
(1)高杂质耐受性:该 PCR Mix 可直接使用血液、蛋白含量较高的动物组织材料进行 PCR 扩增,无需基因组提取。
(2)高效的快速 DNA 释放剂:尽管该 PCR Mix 可以直接使用组织细胞材料进行扩增,但我们仍然推荐采用 DNA 释放剂进行样本的快速前处理(约需要 5min,可高通量操作)。
DNA 释放剂的前处理,使得制备的 DNA 模板可以进行多次、多基因扩增,并长期保存 DNA,经 DNA 释放剂处理的样本,在室温条件下放置 1 个月,无任何后续影响,-20 可长期保存。
(3)快速 PCR:该酶具有 6kb/min 以上的扩增速度,可显著的缩短 PCR 的扩增时间,在常规测试条件下,10s 的延伸时间可完成 1kb 的基因组 DNA 扩增。
(4)粗制样品的扩增能力:扩增能力>4kb。
(5)高保真性能:该制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保真 DNA 聚合酶,因此其具有一定的保真性能(经蓝白斑测试,其保真性能约为 Taq DNA 聚合酶的 56 倍)。
(6)热启动,防止非特异性扩增:RAPA3G 系列产品均采用 专有的热启动技术,确保 50 度以下完全无活性,仅有 95 度加热 5min 以后才能恢复其活性,因此可 限度的提高扩增的特异性,减少非特异性产物的产生。

包装:
2023020701360028339
注意:2×RAPA3G PCR Mix (with Dye)制品可单独订购
储存:长期储存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 个月)保存。
使用方法
1. DNA 释放
(1)采用加热法:取 2-10 个毛发囊、1-10mg 动物组织等材料,放入到 0.2ml EP 管中,加入 50 μl 快速 DNA 释放剂A,于 PCR 仪中 98°C 加热 5min,加热完毕后加入 50 μl快速 DNA 释放剂 B,混合均匀,即可使用。
(2)采用钢珠研磨法:取 1-10mg 动物组织等材料,放入到 2ml EP 管中,加入 250 μl 快速 DNA 释放剂 A 和 2-3 粒钢珠,研磨 1-2min 成浆体装。研磨完毕后加入 250 μl 快速DNA 释放剂 B,混合均匀,即可使用。
2. 按下表配制 PCR 反应体系并混合均匀:
2023020701363183282
注意:当扩增片段>5kb 时,引物用量调整为 0.25-0.5μl。
3. PCR 扩增循环参数
2023020701364976789
请注意:(1)该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩短,否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。(2)当扩增片段<1kb时,延伸时间使用 15s;扩增片段 1-2kb 时,延伸时间使用45s,扩增片段 2-3kb 时,延伸时间使用 1min,当扩增片段>3kb 时,请按照 2kb/min 的延伸时间进行设置。(3)尽管该酶具有 6kb/min 的延伸速度,但按照 2kb/min 设置延伸时间的条件下,能获得 的产量。
3. 注意事项:(1) 当模板 GC 含量>70%时,请添加5× Q-Solution(Cat. No.: A3002)。(2)当采用全血、血浆等蛋白含量极高的样本时,扩增完毕后可能会有变性的蛋白沉淀,请离心后再进行点样和电泳。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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