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1M山梨醇溶液/酵母电转感受态细胞制备液(过滤除菌)
- 品牌:LMAI Bio
- 产地:中国/上海
- 型号:100mL
- 货号:LM8203-100mL
- 价格: ¥198/毫升
- 发布日期: 2023-02-03
- 更新日期: 2023-12-08
产品详请
产地 | 中国/上海 |
保存条件 | 2-8℃ |
品牌 | LMAI Bio |
货号 | LM8203-100mL |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
规格 | 100mL |
用途范围 | 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。 |
纯度 | 99% |
是否进口 | 否 |
1M山梨醇溶液/酵母电转感受态细胞制备液(过滤除菌)
英文名:1M Sorbitol Solution
储存条件:4℃保存,有效期 1 年。
产品内容:
产品说明:
1M 的山梨醇一般用于酿酒酵母或者裂殖酵母电转感受态的制备。
酵母感受态细胞的制备:
1. 活化菌种。-80℃保存的菌种在固体 YPDA 培养基(YPDA 加 20g Agar/L)上划线,在 30℃培养 2-4 天。
2. 挑取酵母单菌落在固体 YPDA 培养基上划 3-5 mm 的短线,在 30 ℃培养 2-4 天。待酵母单菌落长至 2 mm
长时,接种。
3. 首先把酵母细胞接种到 50 ml 液体 YPDA 培养基的三角瓶中继续培养,待 OD600 到 1.3-1.5 范围内。
4. 将酵母菌置于冰上放置 10 min 后,收集细胞。1000 g,离心 5 min, 去上清。
5. 沉淀用 30-50 ml 的预冷的无菌水悬浮。1000 g,离心 5 min,去上清。重复洗涤 2 次。
6. 沉淀用 5mL 冰上预冷的 1M 山梨醇溶液重悬。1000 g,离心 5 min,去上清。
7. 沉淀用 0.4 mL 的预冷的 1M 山梨醇溶液重悬,按照 40 uL 分装。
酵母转化:
1. 在 40uL 的酵母感受态细胞中,加入 5uL(100ng)的质粒,混匀。
2. 转移到预冷的电转槽中,电击。
3. 在电转槽中加入 500uL 预冷的 1M 山梨醇溶液,轻柔混匀。
4. 涂布于相应的筛选培养基上,28-30℃培养 3-5 天。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。