英文名：Yeast Plasmid Preps Kit
储存条件: RT 储存，未开封可保存 24 个月。
产品内容:

产品说明：
本试剂盒用于酵母质粒的小量提取实验，提取过程无需酶解，无需使用酚、氯仿等有毒有害试剂。本试剂盒使用传统沉淀法纯化，耗时稍长（整个提取过程约需 3 h），但可获得较高的产率。对于大片段质粒（＞10 Kb），与市场常规吸附柱纯化方法相比，损耗率较低。由于酵母质粒拷贝数极低，提取所得质粒，无法通过分光光度计或电泳检测。适用于 PCR 检测或者转化大肠杆菌的实验。
准备工作：
预先在 C 液中加入注明量的无水乙醇，颠倒混匀后置于-20 ℃或冰上待用；在 D 液中加入注明量的无水乙醇待用。
操作步骤：
裂解酵母
1. 用离心管收集 1.5 mL 过夜培养好的酵母菌液，12,000 rpm 离心 30 sec，弃上清；
2. 用 100 μL A 液悬浮酵母菌体，加入 0.2 g 玻璃珠；涡旋震荡 5 min，然后再加入 100 μL A 液，继续涡旋震荡 1-2 min；
3. 在 100 ℃水浴或金属浴上保温 3-5 min 后迅速置于冰上冷却；
4. 12,000 rpm 于 4 ℃离心 10 min。
质粒纯化
1. 吸取 100 μL 的上清液至新离心管中，加入 50 μL B 液，-20 ℃放置 1 h；
2. 12,000 rpm 于 4 ℃离心 10 min，吸取上清液 100 μL 到新的离心管中；
3. 上述上清液中加入 2 倍体积的预冷 C 液（确定已经加入无水乙醇），迅速颠倒混匀，置于冰上 15 min，
12,000 rpm 于 4 ℃离心 10 min。
4. 小心吸弃上清，避免触及沉淀；在沉淀中加入 1 ml 的 D 液（确定已经加入无水乙醇），以 12,000 rpm于 4 ℃离心 3 min；
5. 吸弃上清液，沉淀在室温干燥后，加入 20-50 μL 的 ddH20 溶解沉淀；
6. 所得产物可用于 PCR，转化大肠杆菌等后续实验。
注意事项：
1. C 液和 D 液加入乙醇易挥发，用后及时拧紧盖子。
2. 通常酵母质粒拷贝数较低，通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计很难检测到。
3. 通过此方法提取的酵母质粒 1-5 μL 可用做 PCR 反应的模板或者用于转化大肠杆菌。
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