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酵母质粒小提试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50T
  • 货号:LM8051-50T
  • 价格: ¥568/盒
  • 发布日期: 2023-02-02
  • 更新日期: 2024-05-27
产品详请
产地 中国/上海
保存条件 RT
品牌 LMAI Bio
货号 LM8051-50T
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
是否是肿瘤细胞
规格 50T
纯度 99%
是否进口
酵母质粒小提试剂盒

英文名:Yeast Plasmid Preps Kit
储存条件: RT 储存,未开封可保存 24 个月。
产品内容:

2023020204234067981


产品说明:
本试剂盒用于酵母质粒的小量提取实验,提取过程无需酶解,无需使用酚、氯仿等有毒有害试剂。本试剂盒使用传统沉淀法纯化,耗时稍长(整个提取过程约需 3 h),但可获得较高的产率。对于大片段质粒(>10 Kb),与市场常规吸附柱纯化方法相比,损耗率较低。由于酵母质粒拷贝数极低,提取所得质粒,无法通过分光光度计或电泳检测。适用于 PCR 检测或者转化大肠杆菌的实验。
准备工作:
预先在 C 液中加入注明量的无水乙醇,颠倒混匀后置于-20 ℃或冰上待用;在 D 液中加入注明量的无水乙醇待用。
操作步骤:
裂解酵母
1. 用离心管收集 1.5 mL 过夜培养好的酵母菌液,12,000 rpm 离心 30 sec,弃上清;
2. 用 100 μL A 液悬浮酵母菌体,加入 0.2 g 玻璃珠;涡旋震荡 5 min,然后再加入 100 μL A 液,继续涡旋震荡 1-2 min;
3. 在 100 ℃水浴或金属浴上保温 3-5 min 后迅速置于冰上冷却;
4. 12,000 rpm 于 4 ℃离心 10 min。
质粒纯化
1. 吸取 100 μL 的上清液至新离心管中,加入 50 μL B 液,-20 ℃放置 1 h;
2. 12,000 rpm 于 4 ℃离心 10 min,吸取上清液 100 μL 到新的离心管中;
3. 上述上清液中加入 2 倍体积的预冷 C 液(确定已经加入无水乙醇),迅速颠倒混匀,置于冰上 15 min,
12,000 rpm 于 4 ℃离心 10 min。
4. 小心吸弃上清,避免触及沉淀;在沉淀中加入 1 ml 的 D 液(确定已经加入无水乙醇),以 12,000 rpm于 4 ℃离心 3 min;
5. 吸弃上清液,沉淀在室温干燥后,加入 20-50 μL 的 ddH20 溶解沉淀;
6. 所得产物可用于 PCR,转化大肠杆菌等后续实验。
注意事项:
1. C 液和 D 液加入乙醇易挥发,用后及时拧紧盖子。
2. 通常酵母质粒拷贝数较低,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计很难检测到。
3. 通过此方法提取的酵母质粒 1-5 μL 可用做 PCR 反应的模板或者用于转化大肠杆菌。
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临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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