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快速酵母质粒小提试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50T
  • 货号:LM8052-50T
  • 价格: ¥698/盒
  • 发布日期: 2023-02-02
  • 更新日期: 2024-03-04
产品详请
产地 中国/上海
保存条件 RT
品牌 LMAI Bio
货号 LM8052-50T
是否是肿瘤细胞
规格 50T
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 99%
是否进口
快速酵母质粒小提试剂盒

英文名:Quick Yeast Plasmid Preps Kit
储存条件: RT 储存,未开封可保存 24 个月。
产品内容:

2023020204183930154

产品说明:
本试剂盒在酵母质粒小提试剂盒(PE051)的基础上加以改进,增大了细胞处理量,优化了纯化步骤,节约了提取所用的时间,提高了质粒的产量和纯度。
本品无需使用酚、氯仿等有毒有害试剂,整个实验操作可在 1 h 内完成。快速提取的质粒样品量足以满足 PCR 扩增,以及转化大肠杆菌。
另外,此方法提取的 DNA 虽无蛋白和盐污染,但是会有部分基因组 DNA污染,不能通过测吸光度值来定量,仅适用于 PCR 和大肠杆菌转化实验。
使用方法:
常规提取(需时 60 min)
一、裂解
1. 用 2 mL 的离心管分次离心收集酵母菌液 4 mL,12,000 rpm 离心 30 s,弃上清。
2. 加入 300 μL A 液悬浮酵母菌体,转移至 1.5 mL 离心管中。加入约 0.6 g 玻璃珠,涡旋震荡 2 min,再加入 300 μL B 液,继续涡旋震荡 1 min。
3. 置于-20 ℃冷冻 10 min 或-80 ℃速冻 1 min,然后置于金属浴或水浴 95 ℃解冻1 min。
4. 12,000 rpm 室温离心 3 min。
二、DNA 收集
1. 吸取 300 μL 的上清液至新离心管中,加入 1 mL C 液(结合液),震荡混匀;分两次上 DNA 吸附柱,每次上柱后均先室温放置 2 min,然后 12,000 rpm 离心1 min,倒掉穿透液。
2. 在吸附柱中加入 500 μL D 液(洗涤液),12,000 rpm 离心 1 min,弃穿透液。
3. 再将吸附柱 12,000 rpm 离心 30 s,甩干乙醇。
4. 将吸附柱放入一个干净的 1.5 mL 离心管中。在吸附柱中央加入 50 μL E 液(洗脱液,需 65-70 ℃预热),室温静置 2 min。12,000 rpm 离心 2 min。
5. 穿透液即为酵母质粒 DNA,可用于 PCR、转化大肠杆菌等后续实验。

快速提取(需时 30 min)
一、裂解
1. 用 1.5-2 mL 的离心管离心收集酵母菌液 1.5-2 mL,12,000 rpm 离心 30 s,弃上清。
2. 加入 150 μL A 液 悬浮酵母菌体,转移至 1.5 mL 离心管中。加入约 0.3 g 玻璃珠,涡旋震荡 2 min,然后再加入 150 μL B 液,继续涡旋震荡 1 min。
3. 将上述离心管置于-80 ℃速冻 1 min 后,金属浴或者水浴加热解冻。
4. 12,000 rpm 室温离心 3 min。
二、DNA 收集
1. 吸取 150 μL 的上清液至新离心管中,加入 500 μL C 液(结合液),震荡混匀后加入到 DNA 吸附柱中,然后 12,000 rpm 离心 1 min,倒掉穿透液。
2. 在吸附柱中加入 300 μL D 液(洗涤液),12,000 rpm 离心 1 min,弃穿透液。
3. 再将吸附柱 12,000 rpm 离心 30 s,甩干乙醇。
4. 将吸附柱放入一个干净的 1.5 mL 离心管中。在吸附柱中央加入 50 μL E 液(洗脱液,需 65-70 ℃预热),室温静置 2 min。12,000 rpm 离心 2 min。
5. 穿透液即为酵母质粒 DNA,可用于 PCR、转化大肠杆菌等后续实验。
注意事项:
1. D 液(洗涤液)含有乙醇,易挥发,用后请您及时拧紧盖子。
2. 通常酵母质粒拷贝数较低,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计很难检测到。
3. 如仅需 PCR 检测,可选用本公司酵母阳性克隆快速检测试剂盒(SK2421),无需提取步骤,可直接进行菌落 PCR 扩增。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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