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一步法酵母质粒小提试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50T
  • 货号:LM8055-50T
  • 价格: ¥648/盒
  • 发布日期: 2023-02-02
  • 更新日期: 2024-05-17
产品详请
产地 中国/上海
保存条件 室温,可保存2年
品牌 LMAI Bio
货号 LM8055-50T
是否是肿瘤细胞
规格 50T
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 99%
是否进口
一步法酵母质粒小提试剂盒

英文名:One-step yeast plasmid extraction Kit
保存温度:室温,可保存2年。
产品内容:
2023020204040105286

产品说明:
酵母杂交实验中,需要对筛选平板上的菌落进行鉴定,由于酵母菌具有细胞壁以及质粒拷贝数低,常规的菌P方法鉴定阳性克隆难以达到满意的成功率。一步法质粒小提试剂盒通过提取液快速裂解酵母菌并纯化出质粒,无需使用酚、氯仿等有毒有害试剂,单个实验操作可在20 min内完成,且成功率可达95%以上。本品无需玻璃珠破碎或者溶壁酶破壁处理,相对于传统玻璃珠法提取质粒,本试剂盒的效率更高,此方法提取的酵母质粒无蛋白和盐污染,但会有部分基因组DNA污染,仅适用于PCR和大肠杆菌转化实验。酵母质粒拷贝数极低,不可通过电泳或者分光光度计定量。
注意事项
1. 洗涤液含有乙醇,易挥发,用后请您及时拧紧盖子。
2. 如仅需PCR检测,可优先选用本公司酵母阳性克隆快速检测试剂盒(SK2420) ,无需提取步骤,可直.
接进行菌落PCR扩增。
操作步骤:
常规提取(需时20 min)
一、
裂解
1.将提取液置于65°C水浴预热备用。

2.用1.5或2 mL的离心管离心收集酵母菌液(OD值为1.0左右) 1-1.5 mL,12,000 rpm室温离心1 min,弃上清。
3.向酵母菌沉淀中加入450 μL预热的提取液,吹打或震荡混匀。
DNA收集
1.将裂解产物全部转移至吸附柱中,室温放置2 min,然后12,000rpm 室温离心1 min,弃穿透液。
注意:不可4°C离心,否则会堵塞吸附柱。
2.在吸附柱中加入500 μuL洗涤液,12,000 rpm室温离心1 min,弃穿透液。
3.将吸附柱放回收集管中,12,000 rpm室温离心30s,甩干乙醇。
4.将吸附柱转移至-一个干净的1.5 mL离心管中。在吸附柱中央加入30-50 uL洗脱液(需65-70*C预热),室温静置2min。12,000rpm室温离心2min,穿透液即为酵母质粒DNA。
5.取5μL用于50 μL体系的PCR反应;或取5-10 μL用于大肠杆菌转化。


临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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