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酵母菌落快速转化试剂盒(一步法)
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:20T
  • 货号:LM82390-20T
  • 价格: ¥888/毫升
  • 发布日期: 2023-02-02
  • 更新日期: 2023-12-08
产品详请
产地 中国/上海
保存条件 -20℃
品牌 LMAI Bio
货号 LM82390-20T
是否是肿瘤细胞
规格 20T
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 99%
是否进口
酵母菌落快速转化试剂盒(一步法)

英文名:Quick Yeast Transformation Kit

储存条件:20 ℃储存,未开封有效期 24 个月。
包装内容:

2023020203542552516

产品介绍:
酵母菌落快速转化试剂盒是以未经冻存的酿酒酵母平板菌落(无需摇菌)或者菌液作为菌体来源(短期 4 ℃保存的平板或者菌液亦可使用),无需制备感受态细胞,无需分步热激,一步转化,整个操作流程在 90 min 内完成。省去了通过两次培养获得状态良好的菌体的过程,以及制备感受态的过程,节省了 1-2天的菌种培养转化时间,或者购买感受态的经费。其转化率可达经典酵酿酒母转化方法(SK2400)的 50-80%(常规酵母杂交菌种检测)。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。
菌落转化步骤
1. 在无菌的 1.5 mL 的离心管中加入 100 μL 的 P1 溶液(转化液)。
2. 在上述转化液中加入 1 μg 的质粒 DNA。共转加入每种质粒各 1 μg。
3. 挑取 2-3 个较大酵母菌落加入上述转化液中,震荡混匀。
4. 置于 42 ℃水浴 60 min(每隔 20 min 颠倒混匀一次,避免酵母菌沉底)。
5. 可选步骤:3,000 rpm 离心 3 min,弃上清。用 400 μL YPD Plus Liquid Medium(YT0004)重悬,30 ℃摇床震荡培养 30-60 min。YPD Plus 用于转化后复苏酵母菌,转化效率可以提高 50- 。
6. 3,000 rpm 离心 3 min,弃上清。加入 100 μL 无菌水重悬菌体。
7. 将重悬菌体全部涂布于相应的缺陷型培养基平板上。

8. 30 ℃恒温培养 3-5 天,直至平板长出菌落。
菌液转化步骤:
收集 1.5-3 mL 酵母菌液沉淀后,加入 100 μL P1 溶液(转化液)和 1 μg 质粒 DNA 后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤 4-8 相同。
注意事项:
1. 转化全程要求无菌操作。
2. 为了保证转化效率,感受态不宜直接用液氮冻存。
3. 增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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