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YPD Plus Liquid Medium
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50mL
  • 货号:LM80004-50mL
  • 价格: ¥358/毫升
  • 发布日期: 2023-02-02
  • 更新日期: 2024-06-14
产品详请
产地 中国/上海
保存条件 -20°C
品牌 LMAI Bio
货号 LM80004-50mL
用途 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
是否是肿瘤细胞
规格 50mL
纯度 99%
是否进口
YPD Plus Liquid Medium

英文名:YPD Plus Liquid Medium

储存条件:-20 ℃,未开封有效期 24 个月。
包装内容:

2023020203435703172

说明:本产品经高压灭菌处理,为方便使用,短期可密封置于超净台常温保存。为了避免污染,长时间放置请于低温冰箱保存。
产品说明:
用 LiAc 转化法进行酵母转化时,通常会通过加入 Carrier DNA,选用对数期的酵母菌,以及优化质粒DNA 的质量和浓度等方法来提高转化效率。在完成转化操作后,将转化产物用 YPD Plus Liquid Medium重悬培养 30-60 分钟,有助于酵母细胞复苏,可以有效提高转化效率 50- 。适用于转化酵母菌株Y2HGold、AH109 或 Y187 等,尤其适合对转化效率要求更高的文库转化。
推出的三款转化试剂盒,转化效率为:经典转化 Kit(SK2400)≈Super 转化 Kit(SK2401)>快速转化 Kit(SK2390),其中经典转化 Kit 转化效率可达 103-105 cfu/μg,快速转化 Kit 转化效率可达经典转化效率的 50-80%,转化产物增加 YPD Plus 复苏培养步骤,会在此基础上显著增加转化效率。
质粒转化:
1. 在含有约 1 μg 质粒的 1.5 mL 无菌离心管中,加入 5 μL 预变性的 Carrier DNA(YT0003),50 μL 酵母感受态细胞,350 μL LiAc / PEG3350 混合液(YT0006)轻柔混匀。
2. 30 ℃水浴或者金属浴 30 min,每 10 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
3. 每管加入 20 μL DMSO,轻柔上下颠倒混匀。
4. 42 ℃水浴热激 15 min,每 5 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
5. 3,000 rmp 离心 5 min,弃掉上清。
6. 菌体沉淀用 1 mL YPD Plus Liquid Medium 重新悬浮,30 ℃摇床震荡培养 30-60 min。
7. 3,000 rmp 离心 5 min,弃掉上清,加入 1 mL 无菌 0.9% NaCl

8. 分别稀释 10 倍,100 倍后涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
9. 平板倒置 30 ℃恒温培养 3-5 天。
文库转化:
1. 在含有约 5-15 μg 文库质粒的 15 mL 无菌离心管中,加入 20 μL 预变性的 Carrier DNA,600 μL 酵母感受态细胞,2.5 mL LiAc / PEG3350 混合液轻柔混匀。
2. 30℃水浴 45 min,每 10 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
3. 每管加入 160 μL DMSO,轻柔上下颠倒混匀。
4. 42 ℃水浴热激 20 min,每 5 min 轻柔上下颠倒混匀一次。
5. 3,000 rmp 离心 5 min,弃掉上清。
6. 菌体沉淀用 3 mL YPD Plus Liquid Medium 重新悬浮,30 ℃摇床震荡培养 90 min。
7. 3,000 rmp 离心 5 min,弃掉上清,根据实验需求加入相应体积的无菌 0.9% NaCl 重悬菌体。
8. 涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
9. 平板倒置 30 ℃恒温培养 3-5 天。
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20230202034521392962023020203452966368

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