英文名：10×BU Buffer

保存条件:常温保存，X-gal 储存液-20℃保存，有效期一年。

产品介绍：
本试剂用于 EGY48 酵母杂交系统中，LacZ 报告基因的检测；当有互作发生，lacz 报告基因表达，生成β-半乳糖苷酶，将 x-gal 切割成半乳糖和深蓝色的底物 5-溴-4 氯靛蓝。
每个成分可以单独提供，或直接购买套装。
试剂准备：
1. 筛选培养基配置：请将 0.5L 的 SD/-Trp/-Ura with Agar 干粉，加入 500mL 的蒸馏水中，搅拌后于 115℃灭菌 20min 后倒板；
注意：灭菌的培养基如有剩余，可置于超净台密封保存，再次使用时微波加热溶解后倒板即可。
2. 显色培养基配置：

注意：半乳糖、棉子糖以及 x-gal 请在灭菌后，培养基冷却到 55℃ 之后加入。半乳糖和棉子糖由于加入体积较大，请先置于 55℃ 预热后加入，放置凝固过快。
显色平板请尽快使用。3 天内避光 4℃保存的板子亦可以使用。成分
体积 用量
100mL 500mL
20%半乳糖溶液（过滤除菌） 10mL 50mL
20%棉子糖溶液（过滤除菌） 5mL 25mL
10×BU buffer 10mL 50mL
X-gal 储存液(20mg/ml) 0.4mL 2mL
琼脂粉 2g 10g
SC/-Trp/-Ura Broth 0.8g 4g操作方法：（以 EGY48-pLacZi 酵母单杂交体系为例）
1. 载体构建 pLacZi-X & pB42AD-Y；
2. 载体共转化 EGY48 酵母感受态细胞；
3. 转化产物涂布 SD/-Trp/-Ura with Agar 平板，28-30℃培养 3-5 天；
4. 阳性克隆检测(菌落 PCR)；
5. 阳性菌落涂布 SD-Ura-Trp/x-gal 显色平板，28-30℃培养 3-5 天后观察显色反应。