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LacZ基因胞外表达显色试剂盒
  • 品牌:LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50P
  • 货号:LM83010-50P
  • 价格: ¥1128/块
  • 发布日期: 2023-02-02
  • 更新日期: 2024-03-04
产品详请
产地 中国/上海
保存条件 -20℃
品牌 LMAI Bio
货号 LM83010-50P
是否是肿瘤细胞
规格 50P
用途范围 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途! 以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
纯度 99%
是否进口
LacZ基因胞外表达显色试剂盒

英文名:LacZ extracellular Expression color rendering Kit

保存条件:常温保存,X-Gal 储存液-20℃保存,有效期一年。
产品内容:

2023020203112813515

产品介绍:
本试剂盒用于 EGY48 酵母杂交系统中,LacZ 报告基因的检测;当有互作发生,LacZ 报告基因表达,生成β-半乳糖苷酶,将 X-Gal 切割成半乳糖和深蓝色的底物 5-溴-4 氯靛蓝。
筛选培养基配制:(SD/-Trp/-Ura 平板)
1. 请将 0.5 L 的 SD/-Trp/-Ura with Agar 干粉,加入 500mL 的蒸馏水中,搅拌溶解;
2. 115 ℃灭菌 20 min,冷却后倒板;
注意:灭菌的培养基如有剩余,可置于超净台密封保存,再次使用时微波加热溶解后倒板即可。显色培养基配制:(SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal 平板)
1. 组分配比,见下表;
2023020203120556257

2. 根据需要按照上表称取适量 SC/-Trp/-Ura Broth 和 Agar,加水至 75ml 搅拌溶解;
3. 115 ℃灭菌 20 min;同时预热 20%半乳糖溶液、20%棉子糖溶液、10×BU buffer 至 55 ℃左右;
4. 培养基冷却到 55 ℃左右后加入预热的上述成分以及 X-gal 储存液,混匀倒板。
注意: 显色平板请尽快使用。3 天内避光 4 ℃保存的板子亦可以使用。
实验方法:(以 EGY48-pLacZi 酵母单杂交体系为例)
1. 载体构建 pLacZi-X & pB42AD-Y;
2. 载体共转化 EGY48 酵母感受态细胞(参照 SK2400 使用说明);
3. 转化产物涂布 SD/-Trp/-Ura with Agar 平板,28-30 ℃培养 3-5 天;
4. 随机选择 5 个单菌落,Marker 笔做好标记,挑取少量菌落做阳性克隆检测(参照 SK2420 使用说明);
5. 挑取鉴定为阳性克隆的菌落涂布 SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal with Agar 显色平板,28-30 ℃培养 3-5天后观察显色反应。

临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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