英文名：LacZ extracellular Expression color rendering Kit

保存条件:常温保存，X-Gal 储存液-20℃保存，有效期一年。
产品内容：

产品介绍：
本试剂盒用于 EGY48 酵母杂交系统中，LacZ 报告基因的检测；当有互作发生，LacZ 报告基因表达，生成β-半乳糖苷酶，将 X-Gal 切割成半乳糖和深蓝色的底物 5-溴-4 氯靛蓝。
筛选培养基配制：（SD/-Trp/-Ura 平板）
1. 请将 0.5 L 的 SD/-Trp/-Ura with Agar 干粉，加入 500mL 的蒸馏水中，搅拌溶解；
2. 115 ℃灭菌 20 min，冷却后倒板；
注意：灭菌的培养基如有剩余，可置于超净台密封保存，再次使用时微波加热溶解后倒板即可。显色培养基配制：（SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal 平板）
1. 组分配比，见下表；

2. 根据需要按照上表称取适量 SC/-Trp/-Ura Broth 和 Agar，加水至 75ml 搅拌溶解；
3. 115 ℃灭菌 20 min；同时预热 20%半乳糖溶液、20%棉子糖溶液、10×BU buffer 至 55 ℃左右；
4. 培养基冷却到 55 ℃左右后加入预热的上述成分以及 X-gal 储存液，混匀倒板。
注意： 显色平板请尽快使用。3 天内避光 4 ℃保存的板子亦可以使用。
实验方法：（以 EGY48-pLacZi 酵母单杂交体系为例）
1. 载体构建 pLacZi-X & pB42AD-Y；
2. 载体共转化 EGY48 酵母感受态细胞（参照 SK2400 使用说明）；
3. 转化产物涂布 SD/-Trp/-Ura with Agar 平板，28-30 ℃培养 3-5 天；
4. 随机选择 5 个单菌落，Marker 笔做好标记，挑取少量菌落做阳性克隆检测（参照 SK2420 使用说明）；
5. 挑取鉴定为阳性克隆的菌落涂布 SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal with Agar 显色平板，28-30 ℃培养 3-5天后观察显色反应。