TWEAK简介：

TWEAK是一种分泌性蛋白质，其结构高度保守。TWEAK基因编码249个氨基酸的跨膜蛋白，它包含一个短胞质结构域（aa 1~18）、跨膜结构域（aa 19~42）和一个胞外结构域（aa 43~249）。TWEAK可经furin蛋白酶切割后分泌到细胞外，成为由156个氨基酸构成的可溶性细胞因子。目前体外研究已发现可溶性TWEAK可产生各种生物学效应，而膜结合的TWEAK是否具有生物学活性尚未明确。人类和小鼠TWEAK的细胞外结构域具有89%的aa序列同源性。TWEAK在胰腺，肠，心 脏，大脑，肺，卵巢及骨骼肌等组织中都有表达，在肝脏和肾 脏也有少量表达。

至少有两种结合TWEAK的受体已经被确定。死亡受体3（DR3），也称为TNFRSF12，是一个TNF受体超家族成员，主要在淋巴细胞含量高的组织中表达。有人提出，TWEAK和DR3相互作用诱导细胞死亡涉及NF-κB的激活。在缺乏DR3表达的细胞中，有人提出TWEAK－DR3受体介导的TWEAK－DR3诱导细胞死亡的替代途径。TWEAK是TNF家族中 与Fn14结合的蛋白。TWEAK的主要诱导细胞的调亡，诱导细胞增殖，促炎 症等效应。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中TWEAK的浓度。TWEAK捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的TWEAK会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人TWEAK抗体后，抗人TWEAK抗体与TWEAK接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂，若样本中存在TWEAK将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，TWEAK浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中TWEAK浓度。

人TWEAK参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为58pg/ml。

2.特异性：与人LIGHT, Fas Ligand, GITR Ligand, LTα2/β1,TNF-α TRANCE, TRAIL ,APRIL, 4-1BB/Fc Chimera,OX40 Ligand等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

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