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细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)
物品单位 价格 品牌
200 LMAI Bio
  • 产地:中国/上海
  • 型号:100T
  • 货号:LM80014S
  • 发布日期: 2022-12-27
  • 更新日期: 2023-02-09
产品详细说明
产地 中国/上海
品牌 LMAI Bio
货号 LM80014S
用途范围 自噬 (autophagy) 是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,最终将吞食物在溶酶体内降解的过 程,自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构,内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚 集物,损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。
英文名称
纯度 99%
CAS编号
规格 100T
保质期
是否进口
细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)
Cell autophagy test kit (MDC method)

产品规格:100T

保存条件:-20℃避光保存,有效期 12 个月;避免反复冻融。

简介

自噬 (autophagy) 是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,最终将吞食物在溶酶体内降解的过程,自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构,内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物,损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。
丹酰尸胺 (Dansylcadaverine, MDC ) 是一种荧光色素,是嗜酸性染色剂,通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂,其检测激发滤光片波长 355-380nm,阻断滤光片波长 512-530nm。MDC 染色液适用于培养细胞的荧光自噬染色,又可用 FACS 检测细胞自噬发生的比例,可与 EB 合用双染。
产品组成:

2022122712042470457
使用说明:
(一) 玻片法:
1. 收集细胞,用 300~500μl 的 Wash buffer 清洗细胞 1 次,800~1000g 离心 5min,弃上清。
2. 加入适量的 Stain buffer 重悬细胞,计数并调节细胞浓度至 106/ml。
3. 取 90μl 细胞悬液至新的 1.5ml 离心管中,加入 10μl 的 MDC Stain(10×),轻轻混匀。
4. 37℃或室温避光染色 15~60min。
5. 800~1000g 离心 5min,弃上清,收集细胞,用 300~500μl 的 Wash buffer 清洗细胞 2 次,800~1000g 离心 5min,弃上清。
6. 加入 100μl 的 Wash buffer 重悬细胞,滴加于载玻片上并加盖玻片。
7. 荧光显微镜下观察,计数并拍照;也可用流式细胞仪检测药物干预组 MDC 阳性细胞百分比。
(二) 96 孔板法:
1. 轻轻吸除 96 孔板中的培养液,各孔加入 10μl 的 MDC Stain(10×)和 90μl 的 Stain buffer,37℃ 5%CO2 避光孵育 15~60min。
2. 各孔加入 100μl Wash buffer 清洗 2~3 次。
3. 荧光显微镜或流式细胞仪检测观察。
(二)MDC 与 EB 双染法:
1. 收集细胞,用 300~500μl 的 Wash buffer 清洗细胞 1 次,800~1000g 离心 5min,弃上清。
2. 加入适量的 Stain buffer 重悬细胞,计数并调节细胞浓度至 106/ml。2 / 2
3. 取 90μl 细胞悬液至新的 1.5ml 离心管中,加入 10μl 的 MDC Stain(10×)和 0.2uM EB 染色液,轻轻混匀。
4. 滴加于在玻片上,室温避光染色 15~30min,加盖玻片。
5. 荧光显微镜或流式细胞仪检测观察。
染色结果:
正常细胞:细胞被均匀染成黄绿色荧光
凋亡细胞:染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒
注意事项:
1. MDC Stain 和 EB,试剂有一定毒性,请小心操作。
2. 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
3. Wash buffer 可用 PBS 代替。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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