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产地 | 中国/上海 |
品牌 | LMAI Bio |
货号 | LM86006C |
用途 | 脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有 Feulgen 法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等,其 中最经典的是 Feulgen 法, Feulgen 法是一种经典的酶组织化学法。 |
英文名称 | |
包装规格 | 3×50ml |
纯度 | 99% |
CAS编号 | |
保质期 | |
是否进口 | 否 |
产品规格:3×50ml
保存条件:4℃避光保存,有效期 6 个月。
简介
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有 Feulgen 法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等,其中 的是 Feulgen 法, Feulgen 法是一种经典的酶组织化学法。
福尔根 DNA 染色试剂盒 (Folgen DNA staining kit) 的原理是 DNA 经温和的弱酸(例如盐酸)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与 Schiff 试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有 DNA 的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团),所以凡含有 DNA 的部位,就呈紫红色。但是该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键,因此 RNA 用此法处理后则分解,所以该法不适用于证明 RNA。
产品组成:
自备材料:
1. 蒸馏水或去离子水
2. 系列乙醇
3. 加热设备
4. 染色缸
使用方法:
(一) 石蜡切片染色
1. 组织固定:Carnoy 固定的石蜡切片较好,10%的福尔马林亦可,不宜使用 Bouin 固定液。
2. 石蜡切片脱蜡至水。
4. 室温下在弱酸工作液中浸洗一下。
5. 切片放入已预热到 60℃的弱酸工作液,孵育 8min。
6. 切片放入室温的弱酸工作液中冲洗 1min。
7. 蒸馏水冲洗。
8. 切片入 Schiff reagent 内,置于室温暗处染色 30~60min。
10. 用新鲜配制的 SO2 水工作液洗切片 3 次,每次 90s。
11. 蒸馏水中洗净。
12. 脱水、透明、封片。
(二) 冰冻切片染色
1. 冰冻切片预处理:先用乙酸:乙醇=1:3 混合后,即为固定液,固定 10min。
2. 由无水乙醇脱水--逐级下行--双蒸水。
3. 余下步骤同上述石蜡切片染色。
染色结果:
细胞核内 DNA:红紫色
阴性对照:
将同样切片经上述步骤,只有步骤 5 改为放入室温的弱酸工作液,室温放置 15min。
其结果为细胞核 DNA 阴性。
注意事项:
1. 水解时间很重要,并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。
2. 注意观察 Schiff reagent 的变化,若变浅粉红亦可考虑使用,颜色变红则不能用。
3. 去除切片上多余的 Schiff reagent 的方法应以 SO2 水洗法为好。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 应作阴性对照试验。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。