产品规格:1mg

保存条件:2-8℃避光保存，一年有效。勿冻存。

产品介绍:

免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。
荧光素标记抗体简称荧光抗体（FA），是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流式细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。用于标记的抗体，要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取 IgG、IgM 后再作标记。
本试剂盒中的荧光素采用高质量的AbBy Fluor®荧光素，标记抗体的原理是利用AbBy Fluor®上的NHS基团和抗体上游离的-NH2 发生化学形成 AF-Ab 结合物，即荧光抗体。一般一个 IgG 分子可结合 2-8 个分子的 AbBy Fluor®荧光素分子。
规格：可标记 100ug-1mg 抗体
试剂盒组份：

标记流程图示：

注意事项：
1. 试剂盒保存在 2-8℃, 勿冻存。
2. 试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒，会使液体或干粉试剂沾到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理，以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。
3. AbBy Fluor®需现用现配，溶解后的 AbBy Fluor®不能长期保存。
4. 纯化柱中的缓冲液含有毒性成分叠氮化钠（NaN3）,使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触。
5. DMSO 属微毒类，对人体皮肤有渗透性，对眼又刺激作用，使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触。
6. 标记前抗体的透析，浓缩和浓度测定等操作都会造成抗体量的损失，因此标记前准备抗体时需根据具体情况考虑 的抗体量。
标记操作步骤：
1． 抗体准备
1.1． 建议抗体浓度在 1-2mg/ml 之间。
1.2． 抗体中不要含有 BSA 或其它蛋白质成分。
1.3． 抗体缓冲液中不要含有氨基的盐（如：Tris，NaN3等），pH 在 6.5-8.5 为宜。
2. 抗体标记
2.1． 取出 AbBy Fluor®离心数秒，将管中 AbBy Fluor®干粉甩至管底；
2.2． 管中加入 50ul DMSO 用移液枪反复吹打或 vortex 混匀至 AbBy Fluor®完全溶解；
2.3． 抗体中加入适量调整缓冲液（每 100ul 抗体中加入 10ul 调整缓冲液）；
2.4． 将溶解后的 AbBy Fluor®加入抗体中（每 100ug 抗体中加入 4.0ul AbBy Fluor®）, 用移液枪反复吹打或 vortex 混匀。
2.5． 将抗体-AbBy Fluor®混合物置水平摇床或旋转混匀仪，在摇动状态下室温避光（反应管可包裹锡箔纸）反应 1h。
注： 如果需要较高 F/P 值，可适当延长抗体和 AbBy Fluor®偶联时间。
3. 游离 AbBy Fluor®去除
3.1． 取出纯化柱，将纯化柱 3000rpm 离心 2min。
3.2． 暂时保留收集管中的缓冲液。
3.3． 将纯化柱移至新的收集管上，吸取抗体-AbBy Fluor®偶联物置纯化柱中填料的表面。如果样品体积小于 50ul，应先用 3.2 保留的缓冲液将液体量补足 50ul。上样体积 不要超过 100ul。
3.4． 待样品渗入填料后，3000rpm 离心 2min。
3.5． 将抗体-AbBy Fluor®标记物 4℃避光保存待用。
4. 标记抗体保存
4.1． 标记抗体可 4℃避光保存，也可以根据需要选择加入 BSA、防腐剂、甘油等成分保证产品稳定。
4.2． 推荐保存液：0.01M TBS(pH7.4) 含 1% BSA, 0.03% Proclin300 和 50% 甘油。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。