![]() |
产地 | 中国/上海 |
品牌 | LMAI Bio |
货号 | LM803018C |
用途 | 荧光蛋白上样缓冲液灵敏度高比银染高。稳定性强,背景低。可 |
英文名称 | |
包装规格 | 100ul 1ml |
纯度 | 99% |
CAS编号 | |
保质期 | |
是否进口 | 否 |
产品规格:100ul 1ml
保存条件:可于-20℃储存 12 个月,4℃储存 8 周,室温下储存 1 周。
简介
荧光蛋白上样缓冲液在电泳前的样品处理阶段对 SDS-PAGE 的蛋白样品进行预染,标记上荧光。
实验完成以后,凝胶中或转膜后的蛋白条可直接通过紫外灯、LED 灯或其他数字成像系统进行观察和分析,无需染色脱色。
荧光蛋白上样缓冲液灵敏度高比银染高。稳定性强,背景低。可对所有蛋白进行染色,不影响蛋白的迁移率与电泳图谱。电泳过程中,游离的染料分子与溴酚蓝的迁移速率一致,跑胶结束时移至凝胶末端,背景干净。荧光蛋白上样缓冲液非常适合用于追踪蛋白表达纯化以及 Western blot 的 SDS-PAGE。
每个规格包含 3 管:Instant-Bands, Resuspension Buffer 和 Enhancing buffer。只有使用 Bis-tris 胶时才需要加 Enhancing Buffer.
使用步骤
1. 请在使用前根据管壁标签上的体积加入 resuspension buffer 重悬。Resuspension buffer 在 4℃可能会有沉淀产生,室温下放置至沉淀消失。
2. 将用上样缓冲液处理的蛋白样品与待电泳蛋白样品 1:2 混合。比如,3ul 上样缓冲液+6ul 蛋白样品。
3. 90-100℃加热上述处理的样品混合液 5 分钟。细胞或组织样品,加热时间延长至 10 分钟。确保加热温度>90℃使样品充分受热。
大部分预制胶(Bis-Tris 体系除外)可以直接进行下一步。Bis-Tris 体系的预制胶(如 Life Technology),需加入 20%已处理样品体积的 Enhancing buffer。比如,10ul 已处理的样品需加入 2ul Enhancing buffer。
4. 样品可以上样进行电泳了(无需再加 Loading Buffer 处理)。
5. 电泳结束后,将凝胶放至透射仪上进行观察和拍照。透射仪可以是紫外灯,蓝光 LED 灯或其它凝胶成像系统。如果光源在可见光波长范畴的无需剥胶,因为可见波长范围内的光可以穿透玻璃或塑料材质的胶板。
6. (可选的)如果有需要,经荧光蛋白上样缓冲液处理的凝胶仍可进行考染。按标准的考染步骤进行即可。
注意事项:
1. 请勿使用该上样缓冲液处理预染的或预处理的蛋白分子量标准。这些产品与荧光蛋白上样缓冲液不兼容。
2. 灵敏度影响因素:高 pH(大于 7)不会影响染色,低 pH 则会降低染色的效率,如果样品的 pH 低于
5,建议将 pH 调整至 7 以上。
3. 荧光蛋白上样缓冲液不适合在如下 SDS-PAGE 实验中使用:切割蛋白条带用以测序、质谱分析或抗体制备。
4. 按功能分,有两种:还原型和非还原型。分别用于还原性胶(最常规)和非还原性胶。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。