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产地 | 中国/上海 |
品牌 | LMAI Bio |
货号 | LM87070C |
用途 | 将 DNA 导入细胞的方法很多,采用 DEAE-葡聚糖转染法主要优点是相对简单、快速、同次试验内和 不同次实验间的重复性较好,该法尤其适用于瞬时转染。 |
包装规格 | 10ml |
纯度 | 99% |
CAS编号 | |
是否进口 | 否 |
产品规格:10ml
保存条件:2-8℃保存,有效期 6 个月。
产品简介:
将 DNA 导入细胞的方法很多,采用 DEAE-葡聚糖转染法主要优点是相对简单、快速、同次试验内和不同次实验间的重复性较好,该法尤其适用于瞬时转染。
DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)采用特殊溶剂溶解,经过滤除菌,临用前 37℃保温并充分混匀。
本产品仅用于科研,不宜用于临床诊断或其他用途。
使用说明:
1. 取对数生长期的细胞,制备成细胞悬液。将细胞密度调整到 5×105个/ml 接种至 6 孔板,培养12~24h。
2. 用蒸馏水或TE将质粒DNA稀释,将DNA溶液直接加到转染培养液至其终浓度为0.1~1μg/μl。
3. 将 DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)预热,加到 DNA/转染培养液使 DEAE-葡聚糖终浓度为100μg/ml,最适浓度需要自行摸索。
4. 将 50~70%汇片的细胞培养物中的培养液轻轻吸出,换上适合体积的补充有 DEAE-葡聚糖/DNA/转染培养液,37℃孵育。
5. 倒置显微镜下观察细胞,细胞内会出现颗粒,有的细胞核出现固缩,有的细胞边缘出现部分破碎。有效的 DEAE-葡聚糖转染常伴有 25~75%的细胞死亡。
6. 换用 100mmol/L 氯喹培养液继续培养,进行下游实验。
注意事项:
1. 某些特点细胞需要较长的转染时间,因为氯喹有细胞毒性,可在转染的 时期加入。
2. 转染时,摇动细胞可保障转染效率均一,最适转染时间需通过实验确定。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。