产品规格:100T  500T  10×500T

保存条件:-20℃可保存至少一年。避免反复冻融，建议分装保存。

产品简介：

Enhanced cell Counting Kit-8，即增强型 CCK-8 试剂盒，是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测试剂盒。WST-8 在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的 formazan (见下图) ，且细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅 (生成的 formazan 量) 和细胞数目呈线性关系。

WST-8 是 MTT 的一种升级替代产品，和 MTT 或其它 MTT 类似产品，如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。 ，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的 formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶剂来溶解；而 WST-8 和 XTT、MTS 产生的formazan 都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。 ，WST-8 产生的 formazan 比 XTT 和 MTS 产生的 formazan 更易溶解。第三，WST-8 比 XTT 和 MTS 更加稳定，使实验结果更可靠。第四，WST-8 和 MTT、XTT 等相比线性范围更宽，灵敏度更高，并且更加稳定。
WST-8 对细胞无明显毒性，可以直接加入到细胞样品中，无需预配各种成分；显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，检测时间更加灵活，便于确定 测定时间；酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
使用说明：
本试剂盒可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可用于 药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
细胞数目检测
1. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2. 按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，设置 5-7 个细胞浓度梯度，每组 3-5 个复孔。
3. 接种后培养 2-4h 使细胞贴壁，然后每 100μL 培养基加 10μL CCK-8 试剂培养 1-4h 后测定 OD 值。
4. 以细胞数量为横坐标，OD 值为纵坐标绘制标准曲线。
5. 在实验条件完全一致的条件下可以根据标准曲线，推算出未知样品的细胞数量。

细 胞 活 性检测
1. 在 96 孔板中接种细胞悬液（以每孔不低于 5000 个/100μL 为宜），根据具体实验情况培养过夜或一定时间。
2. 每孔加入 10μL CCK-8 溶液，避免气泡生成。
3. 将培养板置于培养箱内孵育 1-4h，孵育时间需根据细胞的类型和细胞密度等具体情况而定；2h 显色效果 。
4. 用酶标仪测定 450 nm 处的吸光度；若暂时不测定 OD 值，每孔加入 10μL 1%SDS 或 0.1M HCl，避光室温保存，24 小时内进行测定 。
细胞增殖-毒性检测
1. 在 96 孔板中接种细胞悬液（以每孔不低于 5000 个/100μL 为宜），根据具体实验情况培养细胞过夜或一定时间。
2. 每孔加入不同浓度的待测药物。
3. 将培养板在培养箱孵育一定时间。
4. 每孔加入 10μL CCK-8 溶液，避免气泡生成 。
5. 将培养板置于培养箱内孵育 1-4h，孵育时间需根据细胞的类型和细胞密度等具体情况而定；2h 显色效果 。
6. 用酶标仪测定 450nm 处的吸光度；若暂时不测定 OD 值，每孔加入 10μL 1%SDS 或 0.1M HCl，避光室温保存，24 小时内进行测定 。
计算公式：
细胞存活率 =[(ODs-ODb) / (ODc-ODb)] ×
抑 制 率 =[(ODc-ODs) / (ODc-ODb)] ×
ODs: 实验孔吸光度 (含细胞、培养基、CCK-8 溶液和药物溶液)
ODc: 对照孔吸光度 (含细胞、培养基、CCK-8 溶液，不含药物)
ODb: 空白孔吸光度 (含培养基、CCK-8 溶液，不含细胞、药物)
质量验证数据展示：

细胞系及细胞总量：SP2/0、105个/100ul

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。