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产地 | 中国/上海 |
品牌 | LMAI Bio |
货号 | LM802002C |
保存条件 | -20℃ |
用途 | 蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。在强碱性溶液中,双缩脲与 CuSO4 可以形成紫色络合 物,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来进行蛋白质定量 检测。 |
包装规格 | 50T 100T |
纯度 | 99% |
CAS编号 | |
保质期 | 1年 |
是否进口 | 否 |
产品规格:50T 100T
保存条件:2-8℃,标准品-20℃,开封使用后请密封保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。
产品信息:
本试剂盒有效期一年
产品简介:
蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。在强碱性溶液中,双缩脲与 CuSO4 可以形成紫色络合物,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来进行蛋白质定量检测。
该方法适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料;蛋白质浓度测定范围为 1~10mg/ml 。
注意事项:
1. 样品蛋白浓度须在 1~10mg/mL 范围内,低于 1mg/mL 不能用此法,高于 10mg/mL 须做相应稀释。因此测定前用 1~2 个样做预实验,确保蛋白浓度在 1~10mg/mL 范围内。
2. 待测样品蛋白提取可用生理盐水、双蒸水或不含蛋白的 PBS 提取。该法受硫酸铵、Tris 缓冲液干扰,提取液中应不含这些物质;否则改用 BCA 蛋白质含量测定试剂盒(C05-02001)。
3.为得到更为 的蛋白浓度结果,每个蛋白样品均需做复孔。
4.需自备酶标仪,测定波长为 540 nm;酶标仪需与 96 孔酶标板配套使用。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
一.样品蛋白质提取:
(1)组织样品:按照质量体积比(W/V)1:5-1:10 向组织样品中加入提取液(蒸馏水、PBS 或生理盐水均可,需自备),进行冰浴匀浆,然后 10000rpm,4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
(2)细胞样品:按照 5*106个细胞加入 1ml 提取液,冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min);然后 10000rpm,4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
(3)液体样品:澄清无色液体样品可以直接进行测定。
二.样品蛋白质浓度测定:
(1)按下表进行试剂配制:
(2)将各试剂分别进行混匀,然后室温静置 15min
(3)分别吸取 200uL 加入 96 孔板中,测定 540nm 处的吸光度
三.样品蛋白质浓度计算:
(1)组织样品:
C 蛋白质(mg/g 鲜重)= C 标准品÷(A 标准品-A 空白对照)×(A 待测样品-A 空白对照) × V 总÷W样品
(2)细胞样品:
C 蛋白质(mg/104cell)= C 标准品÷(A 标准品-A 空白对照)×(A 待测样品-A 空白对照) × V 总÷Q 细胞相对数
(3)液体样品:
C 蛋白质(mg/mL)= C 标准品÷(A 标准品-A 空白对照)×(A 待测样品-A 空白对照)
C 标准品:5mg/mL;
V 总:样本总体积,ml;
W 样品:样品鲜重,g;
Q 细胞相对数:细胞总数 /104
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。