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RIPA裂解液(M)/RIPA裂解液(中)/RIPA Lysis Buffer
- 品牌:LMAI Bio
- 产地:中国/上海
- 型号:100ml
- 货号:LM801001C
- 价格: ¥220/支
- 发布日期: 2022-11-30
- 更新日期: 2024-05-17
产品详请
产地 | 中国/上海 |
品牌 | LMAI Bio |
货号 | LM801001C |
保存条件 | -20℃ |
用途范围 | RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得到的蛋白样品可 以用于常规的 Western、IP 等。 RIPA 裂解液的主要成分为主要成分 |
纯度 | 99% |
规格 | 100ml |
保质期 | 1年 |
是否进口 | 否 |
RIPA裂解液(M)/RIPA裂解液(中)
RIPA Lysis Buffer
产品规格:100ml
保存条件:-20oC 保存,一年有效。
产品简介
RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP 等。
RIPA 裂解液的主要成分为主要成分为 50mM Tris (pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40, 0.1% SDS 等,另加有蛋白酶抑制剂 Leupeptin、Aprotinin 可以有效抑制蛋白降解。
规格和包装:
保存方法: -20oC 保存,一年有效。
使用说明:
根据使用量,取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、 因 SDS 在低温易析出,如发现 RIPA 有沉淀,请先使其恢复室温,沉淀即可溶解。
2、 裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。
3、 裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用 Bradford 法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的 BCA 蛋白定量试剂盒(编号 C05-02001)测定蛋白浓度。
使用说明:
根据使用量,取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、 因 SDS 在低温易析出,如发现 RIPA 有沉淀,请先使其恢复室温,沉淀即可溶解。
2、 裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。
3、 裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用 Bradford 法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的 BCA 蛋白定量试剂盒(编号 C05-02001)测定蛋白浓度。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。