乙醇含量测试盒/微量法说明书

测定意义：

酒是含酒精（乙醇）饮料的统称，乙醇是酒的主要成分，是衡量酒质量的重要指标之一。我国是 上最早发明酿酒的国家，也是酒类产品消费大国，其消费量居 。因此，快速、准确测定酒中乙醇含量，对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。

测定原理：

乙醇在乙醇脱氢酶的催化下氧化脱氢生成乙醛，同时，NAD 被还原生成 NADH，NADH 在 1-mPMS 的作用下使 WST-8 显橙黄色，通过 450 nm 下测定吸光值变化可测得乙醇含量。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制：
试剂一：液体 12 mL×1 瓶,4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶, -20℃保存；临用前加入 6 mL 试剂三充分溶解待用，用不完的试剂分装后-20℃保存；
试剂三：液体 10 mL×1 瓶,4℃保存；
试剂四：液体 1.5mL×1 管， 4℃避光保存。
乙醇提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 蒸馏水），进行匀浆，8000g，25℃离心 10min，取上清待测。
2. 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水），超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）， 8000g，25℃离心 10min，取上清待测。
3. 血清（浆）等液体样品：直接测定。

测定步骤：
1. 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 450nm。
2. 工作液的配制：临用前按照样本数量，按以下比例配制工作液

3. 样本测定
按下表在 96 孔板中加入如下试剂

混匀后记录 450nm 下测定初始吸光值 A1，和 37℃避光孵育 10min 后的吸光值 A2，计算△A=A2-A1。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。