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乙醇酸氧化酶测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
644 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-877020S
  • 发布日期: 2022-11-25
  • 更新日期: 2022-11-25
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-877020S
用途范围 乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

乙醇酸氧化酶测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。


测定原理:

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在 324nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿。
试剂组成和配制:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 35mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 10mL 双蒸水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
酶液提取:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。12000g, 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定操作表:

2022112509131369677

酶活性计算公式:
1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义:每毫克蛋白每分钟氧化 1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

2022112509133030371

2.按照样本质量计算
酶活性定义:每克组织每分钟氧化 1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

2022112509134604859
ε:乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数:17L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样本体积,0.05mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W,样本质量,
g;T:反应时间,3min
注意事项:
1. 测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
2. 色素含量较高的样品,可在提取酶时加活性炭吸附。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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