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BCA蛋白法含量测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
218 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/96S
  • 货号:LM-876983S
  • 发布日期: 2022-11-24
  • 更新日期: 2022-11-24
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876983S
用途范围 碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将Cu2+还原成Cu+;2分子的BCA与Cu+结合,生成紫色络合物,在540-595nm有吸收峰,562nm处吸收峰最强。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/96S
是否进口

BCA蛋白法含量测试盒/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理:

碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将 Cu2+还原成 Cu+;2 分子的 BCA与 Cu+结合,生成紫色络合物,在 540-595nm 有吸收峰,562nm 处吸收峰 。
自备仪器和用品:
台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂 A:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂 B:液体 0.5mL×1 支,4℃保存。
标准品:液体 2mL×1 支,4℃保存。
工作液配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×0.2mL),将试剂 A 和 B 按照 50:1 的比例混合,盖紧后充分混匀。
样品中可溶性蛋白质提取:
1. 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。
2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水)冰浴匀浆,10000rpm,4℃离心 10min,取上清,即待测液。
3. 细菌、细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后10000rpm,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
测定操作:
1. 可见分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长到 562 nm,蒸馏水调零。
2. 工作液置于 60℃水浴预热 30 min。

2022112409011483923

注意:空白管和标准管只需要做一次。
计算公式:
Cpr (mg/mL)= C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) =0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
Cpr (mg/g 鲜重)= C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ W =0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ W
W: 样本质量,g
注意事项:
BCA 法蛋白含量测定试剂盒,适用于测定蛋白浓度在 20-5000μg/ml 样品。测定前取 1-2 个样做预实验,若A 测定管-A 空白管﹥1.5,需将样本用提取液稀释后再测定,以确保测定的准确性。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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