考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒/微量法说明书

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理：

在酸性溶液中，考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物；该复合物在 620nm 处有 吸收峰，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高，适合微量蛋白质分析。
自备仪器和用品：
离心机、酶标仪、96 孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 11 mL×1 瓶，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取：
1. 液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2. 组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：20 的比例（建议称取约 0.05 g 组织，加入 1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））冰浴匀浆，8000g，4℃离心 10min，取上清，即待测液。（动物样品常常需要稀释）
3. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
测定操作：
1. 酶标仪预热 30 min。
2. 在 96 孔板中加入：

注意：空白管只需要测定一次。
计算公式：
标准曲线：y = 7.1265x - 0.0007 R2 = 0.9997 x: 蛋白标准品浓度(mg/mL)
y: 吸光值差值
1.按液体样本体积计算：
Cpr（mg/mL）=(△A+0.0007)÷7.1265 =0.1403×(△A+0.0007)
2.按组织样本质量计算：
Cpr（mg/g）=(△A+0.0007)÷7.1265×V 总÷W =0.1403×(△A+0.0007)÷W
V 总：提取液体积，1 mL; W：样本质量，g。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。