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考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
175 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/96S
  • 货号:LM-876985S
  • 发布日期: 2022-11-24
  • 更新日期: 2022-11-24
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876985S
用途范围 在酸性溶液中,考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在595nm处有最大吸收峰, 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/96S
是否进口

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理:

在酸性溶液中,考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在 620nm 处有 吸收峰,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。
自备仪器和用品:
离心机、酶标仪、96 孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 11 mL×1 瓶,4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取:
1. 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。
2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:20 的比例(建议称取约 0.05 g 组织,加入 1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水))冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)
3. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
测定操作:
1. 酶标仪预热 30 min。
2. 在 96 孔板中加入:

2022112408570404980

注意:空白管只需要测定一次。
计算公式:
标准曲线:y = 7.1265x - 0.0007 R2 = 0.9997 x: 蛋白标准品浓度(mg/mL)
y: 吸光值差值
1.按液体样本体积计算:
Cpr(mg/mL)=(△A+0.0007)÷7.1265 =0.1403×(△A+0.0007)
2.按组织样本质量计算:
Cpr(mg/g)=(△A+0.0007)÷7.1265×V 总÷W =0.1403×(△A+0.0007)÷W
V 总:提取液体积,1 mL; W:样本质量,g。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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