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双缩脲法蛋白含量测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
115 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50T/48S
  • 货号:LM-876986S
  • 发布日期: 2022-11-24
  • 更新日期: 2022-11-24
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876986S
用途范围 强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
纯度 99%
CAS编号
规格 50T/48S
是否进口

双缩脲法蛋白含量测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理:

强碱性溶液中,双缩脲与 CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为 1~10mg 蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
自备仪器和用品:
离心机、可见分光光度计、移液器、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
标准品:液体 1mL×1 瓶,5 mg/mL,4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取:
1. 液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。
2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水))冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)
3. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min,调节波长到 540 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 蒸馏水,1000μL 试剂一,混匀后室温静置 15 min,于 540nm比色,记为 A 空白管。
3. 标准管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 标准液,1000μL 试剂一,混匀后室温静置 15 min,于 540 nm比色,记为 A 标准管。
4. 测定管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 待测液,1000μL 试剂一,混匀后室温静置 15 min,于 540nm比色,记为 A 测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。

样品中蛋白质浓度计算公式:
C 待测(mg/mL)= C 标准管×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) =5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
注意事项:
1.样品蛋白浓度须在 1~10mg/ml 范围内,低于 1mg/ml 不能用此法,高于 10mg/ml 须做相应稀释。因此测定前用 1~2 个样做预实验,确保蛋白浓度在 1~10mg/ml 范围内。
2.待测样品蛋白提取可用生理盐水、双蒸水或不含蛋白的 PBS 提取。该法受硫酸铵、Tris 缓冲液干扰,提取液中应不含这些物质;否则改用 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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