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高铁还原酶(FCR)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
740 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-876946S
  • 发布日期: 2022-11-23
  • 更新日期: 2022-11-23
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876946S
用途范围 FCR催化Fe3+还原为Fe2+,Fe2+与ferrozine反应显色,在562nm下有特征吸光值。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

高铁还原酶(FCR)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

高铁还原酶(ferric-chelate reductase,FCR)催化高价铁螯合物中的 Fe3+还原为 Fe2+,在部分物种铁元素的吸收中有重要作用。

测定原理:

FCR 催化 Fe3+还原为 Fe2+,Fe2+和 ferrozine 反应显色,在 562nm 下有特征吸光值。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存;
试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存;
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):水 mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 562nm,蒸馏水调零。
2、 工作液配制:将试剂一、二、三以 1:1:1 的比例混合。临用前配制,用多少配多少
3、 在 1mL 玻璃比色皿中,加入 250μL 样本上清和 750μL 工作液,混匀,记录初始吸光值 A1 和 30min 后的吸光值 A2。ΔA=A2-A1。
FCR 活性计算公式:
标准曲线:y = 8.0014x + 0.0011,R2 = 0.9997;
(1)按样本质量计算
单位定义:每 g 样本每分钟产生 1nmolFe2+-ferrozine 定义为一个酶活力单位。
FCR(nmol/min/g 鲜重)=(△A-0.0011)÷ 8.0014×1000×V 标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 4.166×(△A-0.0011)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 蛋白每分钟产生 1nmolFe2+-ferrozine 定义为一个酶活力单位。
FCR(nmol/min/mg prot)=(△A-0.0011)÷8.0014×1000×V 标÷(V 样÷V 样总×Cpr)÷T =4.166×(△A-0.0011)÷Cpr

V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,250μL;V 标:加入标准品体积 ,250μL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol 到 nmol 的转换系数。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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