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植酸酶(phytase)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
441 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/24样
  • 货号:LM-876968S
  • 发布日期: 2022-11-23
  • 更新日期: 2022-11-23
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876968S
用途范围 植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/24样
是否进口

植酸酶(phytase)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理:

植酸酶在一定温度和 pH 值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在 700nm 处有特征吸收峰,根据 700nm 处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅,超声溶解器,回旋式振荡器。
试剂组成和配制:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
缓冲液:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存,临用前加缓冲液 10mL 配制,现用现配;用不完的试剂 4℃保存一个月。
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
显色剂:粉剂×6 瓶,4℃保存,临用前根据用量每瓶加 1mL 双蒸水溶解,再加 4mL 试剂二混匀。
样本处理:
1. 酶制剂:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:500~1000 的比例(建议称取约 0.001g,加入 1mL 提取液)加入提取液,在超声波溶解器上溶解 15min,再用回旋式振荡器振荡 15min,待测。
2. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,在超声波溶解器上溶解 15min,再用回旋式振荡器振荡 15min,4℃,4000g 离心 10min,取上清待测。
3. 饲料样品:饲料烘干粉碎,过 40 目筛,按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,在超声波溶解器上溶解 15min,再用回旋式振荡器振荡 15min,4℃,4000g 离心 10min,取上清待测。
4. 培养液等液体样品,混匀直接测定。
测定操作表:

2022112308473946720

2022112308474805742

酶活性计算公式:
标准曲线:y = 0.2764x + 0.0082,R2 = 0.9998;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值。
1. 按照蛋白浓度计算
酶活性定义:在 37℃,pH5.5 的条件下,每毫克蛋白每分钟从 5mmol/L 的植酸钠溶液中释放出 1μmol 的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/min/mg prot)=(△A-0.0082)÷0.2764÷Cpr÷T =0.1206×(△A-0.0082)÷Cpr2.按照样本质量计算
酶活性定义:在 37℃,pH5.5 的条件下,每克样本每分钟从 5mmol/L 的植酸钠溶液中释放出 1μmol 的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/min /g 鲜重)=(△A-0.0082)÷0.2764÷W÷T =0.1206×(△A-0.0082)÷W
3. 培养液等液体样品
酶活性定义:在 37℃,pH5.5 的条件下,每毫升液体每分钟从 5mmol/L 的植酸钠溶液中释放出 1μmol 的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/min /mL)=(△A-0.0082)÷0.2764÷T =0.1206×(△A-0.0082)
Cpr:样本蛋白含量,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min。
注意事项:
1、显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是 10 个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。
2、ΔA 线性范围为 0.01-2。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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