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木质素过氧化物酶(LiP)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
947 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/96S
  • 货号:LM-892790S
  • 发布日期: 2022-11-22
  • 更新日期: 2022-11-22
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-892790S
用途范围 木质素过氧化物酶催化天青脱甲基,在651nm处测定吸光值减少。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/96S
是否进口

木质素过氧化物酶(LiP)测试盒/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。

测定原理:

木质素过氧化物酶催化天青脱甲基,在 651nm 处测定吸光值减少。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、低温离心机、酶标仪、96 孔板、可调式移液器、冰。
试剂组成和配制: 
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 115mL 蒸馏水,充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存一个月。
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 5mL×1 支,4℃保存。
酶液提取:
1. 组织:按照质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 试剂一)加入试剂一,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 4℃,10000g离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体:直接检测。 
测定操作:
1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 651nm。
2、临用前按每个样本试剂一:试剂二:试剂三=80:40:40(μL)的比例配制工作液,现配现用。
3、在 96 孔板中依次加入如下试剂
2022112209164719627

酶活计算公式:
1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义:每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A651 变化 0.01 为一个酶活力单位。

LiP 活性(U/mg prot)= ΔA×V 反总÷(V 样×Cpr)÷0.01÷T =250×ΔA÷Cpr
2.按照样本质量计算
酶活性定义:每 g 组织在每 mL 反应体系中每分钟 A651 变化 0.01 为一个酶活力单位。
LiP 活性(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T =250×ΔA÷W
3.按照细胞数量计算
酶活性定义:每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每分钟 A651 变化 0.01 为一个酶活力单位。
LiP 活性(U/104 cell)=ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T=0.5×ΔA
4.按照液体体积计算
酶活性定义:每 mL 血清(浆)在每 mL 反应体系中每分钟 A651 变化 0.01 为一个酶活力单位。
LiP 活性(U/mL)=ΔA×V 反总÷V 样÷0.01÷T =250×ΔA
V 反总:反应总体积,0.2mL;V 样:反应中样本体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,2min

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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