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亚铁氧化酶(HP)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
855 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/24样
  • 货号:LM-892798S
  • 发布日期: 2022-11-22
  • 更新日期: 2022-11-22
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-892798S
用途范围 HP催化Fe2+氧化为Fe3+,Fe2+和ferrozine反应显色,在560 nm下有特征吸光值。通过测定Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/24样
是否进口

亚铁氧化酶(HP)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

Hephaestin (HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白亚铁氧化酶,HP 属亚铁氧化酶家族成员,具有亚铁氧化酶的活性,参与体内铁代谢。HP 的表达可受铁、铜及锌等金属离子的调节。HP 催化 Fe2+氧化生成 Fe3+,在介导铁的跨膜转运中有重要作用。

测定原理:

HP 催化 Fe2+氧化为 Fe3+,Fe2+和 ferrozine 反应显色,在 560 nm 下有特征吸光值。通过测定 Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 50 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 30 mL×1 瓶,4℃避光保存。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):水 mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1. 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 560 nm,蒸馏水调零。
2. 在玻璃比色皿中加入下列试剂

2022112208581153570

HP 活性计算:
标准曲线:y = 16.427x - 0.0006,R2 = 0.9998;(x 为标准品浓度,μmol/mL;y 为吸光值 ΔA)
(1)按样本质量计算
单位定义:每 g 样本每分钟氧化 1nmol Fe2+定义为一个酶活力单位。
HP(nmol/min/g 鲜重)=(△A+0.0006)÷ 16.427×V 总÷T ÷(W× V 样÷V 样总)× 1000 = 20.29×(△A+0.0006)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 蛋白每分钟氧化 1nmol Fe2+定义为一个酶活力单位。
HP(nmol/min/mg prot)=(△A+0.0006)÷ 16.427×V 总÷T ÷(Cpr×V 样)× 1000 = 20.29×(△A+0.0006)÷Cpr
V 总:反应体系体积,0.1 mL;V 样:加入样本体积 0.01 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol 到 nmol 的转换系数。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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