土壤脂肪酶(S-LPS)测试盒/分光光度法说明书

测定意义：

LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS 广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰 腺 炎和胰 腺 癌。

测定原理：

LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。
自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯 100mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 14mL×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min。
试剂三：甲苯 100mL×1 瓶，4℃保存（自备）。
试剂四：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
标准品：液体 10μL×1 瓶，10 μmol/mL 的标准溶液，4℃保存。临用前加入 3.168 mL 甲苯，充分溶解。
样本处理
建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min，4℃，4000g 离心 10min，取上清待测。
S-LPS 测定操作：
1. 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 710 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热 30min 以上。
3. 在 5mL EP 管中依次加入下列试剂

37℃振荡反应 10 min 后，8000g，25℃，离心 10min，取上清液

37℃振荡反应 5 min 后，静置 5min，取 800μL 上层液加入 1 mL 玻璃比色皿，于 710nm 处测定吸光值。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
S-LPS 活性计算公式：
活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。
S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T=16×[(A 测定管－A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]÷W
C 标准品：10 μmol/mL；V 反总：反应总体积，2mL；V 样：反应中加入样本体积，0.125mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。