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土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(S-C1)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
1200 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100管/48样
  • 货号:LM-876837S
  • 发布日期: 2022-11-18
  • 更新日期: 2022-11-18
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876837S
用途范围 采用3,5-二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
纯度 99%
CAS编号
规格 100管/48样
是否进口

土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(S-C1)测试盒/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。

测定原理:

C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
 
测定原理: 
采用3,5-二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
 
需自备的仪器和用品: 
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
 
试剂的组成和配制: 
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
 
样品测定的准备: 
称取约 0.1g 新鲜土样或风干土样,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取 30min,然后 10000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
 
测定步骤: 
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在 EP 管中依次加入下列试剂):

2022111809581316345

混匀, 90℃水浴 10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,测540nm 下吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
S-C1 活性计算:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为 y = 6.4078x - 0.0673;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
单位的定义:每 g 土样每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/mL=1000ug/mL;V 反总:反应体系总体积,0.11mL; V 样:加入样本体积,0.01 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min; W:样本质量,g;
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为 y = 3.2039x - 0.0673;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
单位的定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/mL=1000ug/mL;V 反总:反应体系总体积,0.11mL; V 样:加入样本体积,0.01 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min; W:样本质量,g。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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