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土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
1200 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100管/48样
  • 货号:LM-876845S
  • 发布日期: 2022-11-18
  • 更新日期: 2022-11-18
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876845S
用途范围 S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
纯度 99%
CAS编号
规格 100管/48样
是否进口

土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-NAG 是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与机体某些病理状态密切相关。

测定原理:

S-NAG 分解 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有 吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 NAG 活性。

自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 10mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;

样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 400nm,蒸馏水调零。
2、 加样表

2022111809385749215

混匀, 37℃振荡反应 1h 后,90℃水浴 5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,10000g 25℃离心 10min,取上清液(在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂)

2022111809393006664

2022111809395139633

充分混匀,室温静置 2min 后, 400nm 处测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
S-NAG 活力计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.00645x -0.0054;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V 反总÷W÷T =55.81×(ΔA+0.0054)
T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0043x -0.0054;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0054) ÷0.0043×V 反总÷W÷T =83.72×(ΔA+0.0054)
T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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