土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)测试盒/微量法说明书

测定意义：

S-α-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理：

S-α-GC 能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm 有特征光吸收。
 
自备用品： 
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
 
试剂组成和配制： 
试剂一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 10mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂三：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；
 
样品处理： 
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
 
测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。
2、 加样表

充分混匀，室温静置 2min 后， 400nm 处测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
S-α-GC 活力计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0032x -0.0027；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。
单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC 活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0016x -0.0027；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。
单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC 活力（μmol/d /g 土样）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V 反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。