土壤硝态氮测试盒/微量法说明书

测定意义：

硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素，土壤中的有机物分解生成铵盐，被氧化后变为硝态氮。土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接关系到作物的产量与品质。

测定原理：

在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器：
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、振荡仪。
试剂组成和配制：
试剂一：粉剂×2 支，4℃避光保存。临用前根据用量每支加 1mL 浓硫酸充分溶解。
试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
样本处理：
按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 新鲜土样，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，置于振荡仪中振荡提取 1h，25℃，10000g 离心 10min，取上清待测。
测定操作表：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 410nm，蒸馏水调零。
2、 操作表（于 EP 管中加入下列试剂）

计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0156x+0.0073，R2=0.9997
NO₃——N 含量（mg/kg 鲜重）=（△A-0.0073）÷ 0.0156÷（W÷V 样总）=64.1×（△A-0.0073）÷W
V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0078x+0.0073，R2=0.9997
NO3——N（mg/kg 鲜重）=（△A-0.0073）÷ 0.0078÷（W÷V 样总）=128.2×（△A-0.0073）÷W
V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
注意事项：
1. 硝酸根不为土壤胶体吸附，且易溶于水，很容易在土壤内部移动，所以测定此指标时应注意采样深度一致。
2. 土壤经风干或者烘干很容易引起 NO₃——N 的变化，所以 采用新鲜土壤进行测定，以准确反映该指标含量。
3. 试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。
4. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。
5. 检出限为 100μg/kg。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。