土壤碱性蛋白酶(S-ALPT)测试盒/分光光度法说明书

测定意义：

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在碱性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理：

碱性条件下，S-ALPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在 680nm 有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配置：
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 6ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 2mL 试剂七，沸水浴加热溶解，然后加入 8ml 试剂一，充分混匀备用，用不完的试剂 4℃保存；
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 40ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液；
试剂七：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
 
样品处理： 
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定操作：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 680nm，蒸馏水调零。
2、试剂二、三和四 40℃水浴 10min。
3、样本测定：

注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-ALPT 活性计算：
单位定义：每天每 g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个 S-ALPT 活力单位。
S-ALPT(mg/d/g 土样)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=24×(A 测定管-A 对管)÷A标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.4mL；T：反应时间，30min=1/48d；
W：样本质量，0.04g。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。