总多糖含量测试盒/分光光度法说明书

测定意义：

多糖是生物体中广泛存在的物质，是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，它是生物体内重要的生物大分子，是维持生命活动正常运转的基本物质之一。

测定原理：

利用水提醇沉法提取总多糖，苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制：
试剂一：12mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：无水乙醇，自备；
试剂三：浓硫酸，自备。
总多糖提取：
样本烘干粉碎，称取约 0.05g 样本，加入 1mL 水，充分匀浆。100℃水浴提取 2h（必须盖紧盖子防止水分流失），冷却后 10000g 离心 10min，取上清。吸取 0.2mL 上清，慢慢加入 0.8mL 无水乙醇，混匀后 4℃静置过夜，10000g 离心 10min，弃上清，沉淀中加入 1mL 水，充分混匀溶解沉淀。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 490nm，蒸馏水调零。

2、 吸取 400μL 上清，加入 200μL 试剂一和 1mL 浓硫酸，混匀后 90℃水浴 20min，流水冷却。取 1mL 加入比色皿，于 490nm 下测定吸光值 A。
总多糖含量计算：
以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为 y = 15.962x - 0.0037，R2 = 0.9973，x 为葡萄糖含量（mg/mL），y 为吸光值。
总多糖含量(μg/g 干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000=313.24×(A+0.0037) ÷W
V1：醇沉后重新溶解后的体积，1mL；V2：进行醇沉的体积，0.2mL；V3，提取时加入水的体积，1mL；
W：样本质量，g；1000，mg 到 μg 的换算系数。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。