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总多糖含量测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
460 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-876717S
  • 发布日期: 2022-11-17
  • 更新日期: 2022-11-17
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876717S
用途范围 利用水提醇沉法提取总多糖,苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

总多糖含量测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。

测定原理:

利用水提醇沉法提取总多糖,苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制:
试剂一:12mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:无水乙醇,自备;
试剂三:浓硫酸,自备。
总多糖提取:
样本烘干粉碎,称取约 0.05g 样本,加入 1mL 水,充分匀浆。100℃水浴提取 2h(必须盖紧盖子防止水分流失),冷却后 10000g 离心 10min,取上清。吸取 0.2mL 上清,慢慢加入 0.8mL 无水乙醇,混匀后 4℃静置过夜,10000g 离心 10min,弃上清,沉淀中加入 1mL 水,充分混匀溶解沉淀。
测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 490nm,蒸馏水调零。

2、 吸取 400μL 上清,加入 200μL 试剂一和 1mL 浓硫酸,混匀后 90℃水浴 20min,流水冷却。取 1mL 加入比色皿,于 490nm 下测定吸光值 A。
总多糖含量计算:
以葡萄糖作为对照品,标准条件下测定回归方程为 y = 15.962x - 0.0037,R2 = 0.9973,x 为葡萄糖含量(mg/mL),y 为吸光值。
总多糖含量(μg/g 干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000=313.24×(A+0.0037) ÷W
V1:醇沉后重新溶解后的体积,1mL;V2:进行醇沉的体积,0.2mL;V3,提取时加入水的体积,1mL;
W:样本质量,g;1000,mg 到 μg 的换算系数。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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