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纤维素含量(CLL)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
395 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-876720S
  • 发布日期: 2022-11-17
  • 更新日期: 2022-11-17
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876720S
用途范围 纤维素为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β-葡萄糖。β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物。β-糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合,生成糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

纤维素含量(CLL)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖,通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起,是植物细胞壁的主要结构成分。纤维素是一种重要的膳食纤维,是自然界中分布最广、含量 一种多糖。

测定原理:

纤维素为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β-葡萄糖。β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物。β-糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合,生成糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
 
需自备的仪器和用品: 
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。
 
试剂的组成和配制: 
试剂一:液体 50mL× 1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 10mL× 1 支,4℃保存。
 
样品的前处理: 
1、 细胞壁的提取:取约 0.3g 样本,加入 1mL 80%乙醇,室温快速匀浆,90℃水浴 20min(加热过程中 EP管可能爆开,建议用胶带封口或使用防爆 EP 管),冷却至室温,6000g 25℃离心 10min,弃上清。沉淀加入 1.5mL80%乙醇和丙酮各洗一遍(涡旋振荡 2min 左右,6000g 25℃离心 10min,弃上清即可),沉淀即为粗细胞壁,加入 1mL 试剂一(去除淀粉)浸泡 15 小时,6000g 25℃离心 10min,弃上清,将沉淀干燥,称重得细胞壁物质(CWM)。
2、 纤维素的提取:称取烘干的 CWM 约 5mg,加入 0.5mL 蒸馏水充分匀浆(若烘干物质质地坚硬,可先研碎后再加入 0.5mL 蒸馏水匀浆,或者用匀浆器匀浆),匀浆液转移至 EP 管中,用蒸馏水定容至0.5mL,置于冰水浴中,缓慢加入 0.75mL 浓硫酸,混匀,冰水浴中静置 30min。8000g 4℃离心 10min,取上清液,用蒸馏水稀释 20 倍后待测。
 
测定步骤: 
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 620nm,蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至 95 度。
3、工作液的配制:在试剂二中加入 4mL 试剂三,充分溶解,如较难溶解,可加热搅拌;用不完的试剂 4℃保存一周;
4、加样表(在 EP 管中反应):

2022111711210270123

混匀,置 95 度水浴中 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,于 620nm 处,分别读取空白管和测定管吸光值,ΔA=A 测定管-A 空白管。
注意:
1、空白管只要做一管。
2、由于浓硫酸具有强腐蚀性,请谨慎操作。
纤维素含量计算:
1、标准条件下测定的回归方程为 y = 7.875x - 0.0043;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
2、按样本质量计算:
纤维素(mg /g 干重)= [(ΔA+0.0043) ÷7.875×V1]÷(W×V1÷V2)×20=3.17×(ΔA+0.0043) ÷W。
V1:加入样本体积,0.3mL;V2:加入提取液体积,1.25mL;W:样本干重,约 5×10-3g;20:样本稀释倍数。
注意: 检测限为 1mg/g 干重或 10ng/ mg prot

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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