硫代葡萄糖苷含量测试盒/分光光度法说明书

测定意义：

硫代葡萄糖苷（Glucosinolates），简称硫苷，是十字花科蔬菜中的一种重要的次生代谢产物，根据侧链基团的不同，可以把硫苷分为脂肪族、芳香族和吲哚族三大类。

测定原理：

硫葡糖苷酶催化硫代葡萄糖苷反应产生葡萄糖。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505 nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存，临用前加入 1.5mL 试剂二溶解待用，用不完的试剂分装后-20℃保存；
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：液体 20mL×1 瓶，4℃避光保存；
试剂四：液体 20mL×1 瓶，4℃避光保存。
样本处理：
样本烘干粉碎，过 100 目筛。称 0.1g 样本，加入 1mL 蒸馏水，100℃水浴提取 60min。冷却至室温，10000g4℃离心 10min，取上清待测。

测定操作：

计算公式
标准曲线： = 1.869x + 0.0043，R2 = 0.9999；x 为标准品浓度：μmol/mL；y 为吸光度 A。
硫代葡萄糖苷含量（yμmol/g 鲜重）=（ A -0.0043）÷ 0.9345×V 样÷(V 样÷V 样总×W )△（ 0.0043）÷ W=0.535× △A - △V 样，加入样本上清体积，0.250mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g。

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