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蔗糖合成酶(分解方向 SS-Ⅰ)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
855 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/24样
  • 货号:LM-876680S
  • 发布日期: 2022-11-16
  • 更新日期: 2022-11-16
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876680S
用途范围 SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游离果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖的含量来反映酶活性的高低。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/24样
是否进口

蔗糖合成酶(分解方向 SS-Ⅰ)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是双向反应酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代谢的关键酶之一。研究其分解方向 SS-Ⅰ的活性对于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意义。

测定原理:

SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游离果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖的含量来反映酶活性的高低。

需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、离心机、移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰

试剂的组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二: 液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×2 支,-20℃保存;临用前每支加入 1.2mL 试剂二充分溶解待用,现配现用;试剂四:液体 6mL×1瓶,4℃保存。

样品测定的准备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定,(在 EP 管中依次加入下列试剂):

2022111603460883479

混匀,540nm 下测定各管吸光值。ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管需要设一个对照管。

SS-Ⅰ活性计算:
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0012x - 0.0492;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为ΔA。
2、按照蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)=[ (ΔA+0.0492) ÷0.0012×V 反总]÷(V 样×Cpr) ÷T=138.9×(ΔA+0.0492) ÷Cpr
3、按照样本鲜重计算
单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/g 鲜重) =[(ΔA+0.0492) ÷0.0012×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=138.9×(ΔA+0.0492) ÷W
V 反总:反应体系总体积,0.1mL; V 样:加入样本体积,0.02 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;
T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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