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蔗糖合成酶(合成方向 SS-Ⅱ)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
510 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/24样
  • 发布日期: 2022-11-16
  • 更新日期: 2022-11-17
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876692S
用途范围 SS-Ⅱ催化游离果糖与葡萄糖供体UDPG反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/24样
是否进口

蔗糖合成酶(合成方向 SS-Ⅱ)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是双向反应酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代谢的关键酶之一。研究其合成方向 SS-Ⅱ的活性对于植物蔗糖合成具有重要意义。

测定原理:

bSS-Ⅱ催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 4mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 3mL×1 瓶,4℃保存
试剂四:液体 40mL×1 瓶,4℃保存;
试剂五:液体 12mL×1 瓶,4℃避光保存;
样品测定的准备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:

2022111603204801834

混匀,沸水浴 30min,冷却后, 480nm 下测定各管吸光值。标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。

SS-Ⅱ活性计算:
1、按照蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
2、按照样本鲜重计算
单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性(μg /min /g 鲜重) = C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准管:标准管浓度,1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.03mL; V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T :反应时间:10min。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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