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支链淀粉含量测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
740 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-876659S
  • 发布日期: 2022-11-16
  • 更新日期: 2022-11-16
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876659S
用途范围 利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

支链淀粉含量测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

支链淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响,对于不同比例直、支链淀粉的淀粉的研究具有重要的意义。

测定原理:

利用 80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。

试剂的组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶;4℃保存;
试剂二:乙醚 50mL×1 瓶;4℃保存;(自备)
试剂三:液体 50mL×1 瓶;4℃保存;
试剂四:液体 4mL×1 瓶;4℃保存;
试剂五:液体 1mL×1 瓶;4℃保存;

淀粉提取:
称取 0.01~0.02g 烘干样本(建议称取约 0.01g)于研钵中研碎,加入 1mL 试剂一,充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀,加入 1mL 试剂二(乙醚)振荡5min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀,加入 1mL 试剂三充分溶解,90℃水浴 10min,冷却后待测。

测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,蒸馏水调零。
测定管:在 EP 管中依次加入 100uL 样本, 70uL 试剂四,600uL 蒸馏水,10uL 试剂五,220uL 蒸馏水,混匀,分别测定 550 和 743nm 处吸光值,ΔA 测定=A550-A743。
空白管:在 EP 管中依次加入 100uL 试剂三,70uL 试剂四,600uL 蒸馏水,10uL 试剂五,220uL 蒸馏水,混匀,分别测定 550 和 743nm 处吸光值,ΔA 空白=A550-A743。

支链淀粉含量计算:
标准条件下测定的回归方程为 y=0.1214x+0.0076;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
1、按照蛋白浓度计算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA 测定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干重计算

支链淀粉含量(mg/g 干重)= [(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA 测定-ΔA空白-0.0076) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
W:样本质量,g 检测限为 10mg/g 干重或 0.1mg/mgprot。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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